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细菌的简单染色
实验二 细菌的简单染色一、目的要求
学习微生物涂片、染色的基本技术。
初步认识细菌的形态特征。
掌握细菌的简单染色法。二、基本原理
染色是细菌学上的一个重要而基本的操作技术。因细菌个体很小，含水量较高，在油浸镜下观察细胞几乎与背景无反差，所以在观察细菌形态和结构时，都采用染色法，其目的是使细菌细胞吸附染料而带有颜色，易于观察。
细菌的简单染色法，是用一种染料处理菌体，此方法简单，易于掌握，适用于细菌的一般观察。
常用碱性染料进行简单染色。这是因为:在中性、碱性或弱碱性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，因此，碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下易于识别。
三、材料及器材
菌种:培养24h的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，培养12,16h的枯草杆菌，牙垢。
四、方法与步骤
涂片
用接种环以无菌操作从试管培养液中取一环菌，于载玻片中央涂成薄层即可，或滴一小滴生理盐水于载玻片中央，用接种环从斜面上挑出少许菌体，与水滴混合均匀，涂成极薄的菌膜。
干燥
涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略微加热，使之迅速干燥。
固定
固定的目的是:杀死微生物，固定其细胞结构;保证菌体能牢固地附着在载玻片上，以免水洗时被水冲掉;改变菌体对染料的通透性，一般死细胞的原生质容易着色。
染色。滴加结晶紫或其它染色液，覆盖玻片涂菌部分，染色1min。
水洗。
干燥。
镜检。
五、实验报告及作业
绘出枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、螺旋菌的形态图，注明放大倍数。
在进行细菌制片时应注意什么,
六、实验结束、检查试验仪器破损情况，清理实验室
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