第十四章--RNA的生物合成省公开课金奖全国赛课一等奖微课获奖PPT课件.pptxVIP

第一章

RNA生物合成;转录基本特点

转录条件

原核生物转录

真核生物转录

RNA转录产物加工

RNA复制;RNA生物合成两种方式

转录：DNA指导RNA合成，生物体内主要合成方式。

RNA复制：RNA指导RNA合成，常见于病毒。

RNA前体（RNAprecursor）：转录产生初级转录本，需经加工为成熟RNA后才含有生物学活性与功效。;不对称转录（asymmetrictranscription）：转录时，只以双链DNA中一条链作为模板进行转录，将遗传信息由DNA传递给RNA现象。;模板链(templatestrand)及反（无）意链(antisensestrand)：指导RNA合成DNA链，又称为负链（－链）。

编码链(codingstrand)及有意链(sensestrand)：不作为转录模板另一条DNA链，又称为正链（+链）。

有意链与反意链并非固定不变。;转录连续性

RNA转录合成时，以DNA作为模板，在RNA聚合酶催化下，从头连续合成一段RNA链（不需要引物），各条RNA链之间无需再进行连接。

单顺反子：合成RNA中只含一个基因遗传信息。

多顺反子：合成RNA中含有几个基因遗传信息。;转录单向性：RNA转录合成时，只能向一个方向进行聚合，所依赖模板DNA链方向为3’→5’，而RNA链合成方向为5’→3’。

转录不需要引物;转录起点（startpoint）：与新生RNA链第一个核苷酸相对应DNA链上碱基，此点通惯用+1表示；

上游（upstream）：转录起点前面（5’末端）序列，用负数表示；

下游（downstream）：转录起点后面（3’末端）序列，用正数表示。;;第二节转录条件;三、RNA聚合酶;大肠杆菌RNA聚合酶

每个细胞中约有3000个RNA聚合酶分子；

组成：全酶由2个α、β、β’、?、σ5种亚基组成，椭圆球形，可结合约60个核苷酸；;关键酶：没有σ亚基酶，只催化RNA链延长，对转录起始无作用；;;真核生物RNA聚合酶

三种RNA聚合酶：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。

每个酶分子有两个大亚基，还有10个左右小亚基。

RNA聚合酶Ⅰ：位于核仁中，活性最显著，负责转录rRNA基因。

RNA聚合酶Ⅲ：负责合成tRNA和核内小RNAs，其活性可被高浓度α-鹅膏蕈碱所快速抑制。

RNA聚合酶Ⅱ：位于核浆中，负责hnRNA（mRNA前体）合成，其活性可被低浓度α-鹅膏蕈碱所快速抑制。;由8~14个亚基组成，分子质量为500KDa。;CTD去磷酸化：RNA聚合酶II易与DNA结合，这种构象适于转录起始；

CTD磷酸化：可使RNA聚合酶II与DNA结合变得松弛，形成适于延伸构象。;噬菌体RNA聚合酶

仅由一条多肽链组成；

合成速度很快，在37℃时可达约200核苷酸/秒；

噬菌体RNA聚合酶只能识别噬菌体本身所含有开启子，不能识别其它开启子。

线粒体和叶绿体中RNA聚合酶

和细胞核中酶完全不一样，分子较小。

类似于噬菌体RNA聚合酶。;抑制剂;;开启子共同次序：是开启子关键部位，在RNA转录起点上游大约10bp和35bp处有两个共同次序（-10和-35序列）

-35区：T85T83G81A61C69A52（-35bp，-35序列）

-10区：T89A89T50A65A65T100（-10bp，-10序列）

-35序列：RNA聚合酶全酶识别位点，对全酶有很高亲和性，提供RNA聚合酶识别信号。

-10序列：又称TATA盒（Pribnowbox），是RNA聚合酶全酶紧密结合位点，有利于DNA局部双链解开，决定着双链解开速度和转录方向。;开始转录;;;;;上游开启子元件（upstreampromoterelement，UPE）：又称上游激活序列（upstreamactivatingsequence，UAS）位于关键开启子上游，主要包含CAAT框和GC框，各自保守序列与结合蛋白因子各不相同，其功效是控制转录起始频率。

CAAT框：位于上游-70~-80区，其保守序列为GG

CCAATCT；

GC框：位于-80~-110区，其保守序列为GGGGC

GG，是转录因子SP1结合位点。;增强子（enhancer）：增强真核生物开启子活性DNA次序。长约100～200bp，其关键组件常为8～12bp，能够单拷贝或多拷贝串联形式存在。;缄默子（silencer）：抑制基因表示活性DNA序列，起与调控蛋白结合后可抑制转录起始复合物活化；其作用不受距离和取向限制。

应答元件：真核细胞DNA上存在能对特定环境原因作出应答反应DNA序列。能专一结合特异性蛋白因子，从而调控基因特异表示，如：糖