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骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的动物实验研究的开题报告

题目：骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的动物实验研究

一、研究背景和意义

下肢缺血是常见的血管疾病，其主要病因为动脉硬化和栓塞，导致足部和脚踝处的皮肤干燥、发红和疼痛等症状。虽然现已有多种治疗方式可供选择，但效果较差、副作用大。近年来，以基因工程技术为基础的干细胞移植治疗逐渐成为治疗下肢缺血的新方法。

骨髓来源的血管内皮祖细胞是一种潜在的治疗下肢缺血的干细胞。其具有分化成功能性内皮细胞和促进组织再生的潜力，可以促进新血管生长，缓解缺血病变区域的缺血状态。因此，通过将骨髓来源的血管内皮祖细胞移植到下肢缺血动物体内，可以探究其治疗效果及其治疗潜力，为下一步广泛应用该技术提供一定的实验依据。

二、研究内容和目的

本研究旨在探究骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的动物实验研究，并发掘其可能机制。

研究内容：

1.骨髓来源的血管内皮祖细胞的提取和培养。

2.筛选、繁殖和生物学特性鉴定。

3.建立下肢缺血动物模型。

4.骨髓来源的血管内皮祖细胞移植到下肢缺血动物体内并探究其治疗效果及机制。

研究目的：

1.评价骨髓来源的血管内皮祖细胞移植对下肢缺血的疗效。

2.探究骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的可能机制。

3.为骨髓来源的血管内皮祖细胞应用于下肢缺血的临床治疗提供实验依据。

三、研究方法

1.制备骨髓来源的血管内皮祖细胞

将小鼠骨髓中隆起细胞进行分离培养，3-5天后采用流式细胞术筛选纯度。经过三次连续培养后，取其中间层的细胞作为骨髓来源的血管内皮祖细胞。

2.下肢缺血动物模型建立

采用改良版双臂高压双相注射法制备小鼠下肢缺血模型。

3.实验方案

将13只下肢缺血模型小鼠制备为实验组，骨髓来源的血管内皮祖细胞移植至小鼠下肢缺血处。另13只下肢缺血模型小鼠制备为对照组，注射等体积PBS。治疗后观察小鼠下肢伤口愈合情况并进行相关生物学指标检测，如新生血管数目、血流灌注度、NO代谢等指标。

4.数据分析

用SPSS进行数据处理和统计分析，并采用Grubbs和Dixon的统计学方法消除异常值的影响。使用图表和表格对实验数据进行直观呈现。

四、研究预期结果

1.建立骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的动物实验模型。

2.探究骨髓来源的血管内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的治疗效果及其机制。

3.提供临床治疗下肢缺血的新方法和实验依据。

五、研究进度安排

本次研究的具体计划如下：

第一年：完成骨髓来源的血管内皮祖细胞的提取和繁殖，并建立下肢缺血动物模型。

第二年：进行骨髓来源的血管内皮祖细胞移植下肢缺血动物体内，并收集相关数据。

第三年：分析实验结果并得出结论，撰写研究报告。

六、研究人员

本研究的主要参与人员为：

1.负责人：XXX，北京大学医学部教授。

2.主要研究人员：XXX、XXX、XXX、XXX，北京大学医学部博士研究生。

3.其他工作人员：采购、动物养护等相关工作人员。

七、研究经费

本研究的预计经费为XX万元，主要用于实验耗材和动物养护等方面。