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NES1基因在胃癌中的表达及甲基化调控机制的研究的开题报告
一、选题背景和意义
胃癌是一种高发于亚洲地区的恶性肿瘤，尽管在诊疗技术和治疗手段方面有所提升，但其病情依然危及患者的生命健康。现有研究表明，胃癌的发生发展受到多种因素的影响，其中基因表达与DNA甲基化调控机制的异常与胃癌的关系备受关注。NES1基因是人体内一种新型的抑癌基因，其能够控制多种肿瘤细胞的增殖、凋亡以及癌细胞的侵袭能力，减缓肿瘤发展的进程。但是，目前关于NES1基因在胃癌中的表达及其甲基化调控机制的研究还不充分，因此有必要对其开展深入研究，为胃癌的防治提供新的思路和方法。
二、研究目的
本研究旨在探究NES1基因在胃癌中的表达及其甲基化调控机制，具体研究目的如下：
1.研究NES1基因在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况；
2.分析NES1基因在胃癌细胞株中的表达情况，探讨其与胃癌细胞的侵袭能力的关系；
3.研究NES1基因的启动子区域的甲基化状态及其对NES1基因的表达的调控作用；
4.探究DNA甲基转移酶在NES1基因甲基化过程中的作用以及对胃癌细胞的影响。
三、研究内容和方法
1.研究样本
本研究将采集20例胃癌患者组织及其旁边正常组织，同时选取人胃癌细胞株作为研究样本。
2.实验方法
（1）qPCR：采用qPCR技术检测NES1基因在不同样本中的表达情况，分析其在胃癌细胞中的表达与侵袭能力之间的关系。
（2）甲基化特异性PCR（MSP）：设计甲基化和非甲基化特异性引物，检测NES1基因甲基化状态并探究其对NES1基因表达的影响。
（3）DNA甲基转移酶抑制剂处理：采用DNA甲基转移酶抑制剂处理胃癌细胞，检测NES1基因表达情况的变化及其对癌细胞侵袭能力的影响。
四、预期结果
本研究预计得到如下结果：
1.NES1基因在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况有所差异。
2.NES1基因在胃癌细胞株中表达下降与胃癌细胞的侵袭能力增强有相关性。
3.NES1基因的启动子区域存在甲基化修饰，并且甲基化较高与NES1基因表达较低有相关性。
4.DNA甲基转移酶抑制剂处理后，NES1基因表达增加，胃癌细胞的侵袭能力减弱。
五、研究意义和创新点
1.本研究将揭示NES1基因在胃癌中的表达和甲基化状态，为胃癌的防治提供重要的理论研究基础。
2.结合NES1基因对癌细胞增殖和侵袭的抑制作用，本研究的结果将提供开发新型的治疗胃癌的靶向药物的思路和方法。
3.通过研究NES1基因的甲基化调控机制，本研究将为深入探究DNA甲基化在胃癌发生发展中的作用提供新的思路和方法。
四、研究进度安排
1.月份：完成选题和开题报告
2.月份：完成研究方案设计和实验方法的优化
3.月份：完成样本采集和搜集所需实验材料
4.月份：完成qPCR技术和MSP技术的优化和建立
5.月份：完成实验数据的采集、整理和分析
6.月份：完成全面数据统计和分析，撰写论文，准备答辩材料
7.月份：完成毕业论文答辩
八、参考文献
[1]SunC.Y.,XuP.X.NE1andNES1/KLK10:uniqueproteinsorjustanotherkallikrein？CritRevOncolHematol,2010,73(1):68-83.
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[3]Tan,H.,Yan,F.,Wang,Q.,etal.HypermethylationofCPNE6ingastriccanceranditsrelationshipwithclinicopathologicalfeatures.Digestivediseasesandsciences,2012,57(5):1215-1221.
[4]Smith,E.Y.,Jin,L.,Shenoy,A.K.,etal.TGFβreceptorIphosphorylationintherenaldistalconvolutedtubuleepitheliumregulatesbloodpressure.JournaloftheAmericanSocietyofNephrology,2013,24(6):966-973.
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