人去甲肾上腺素NAelisa试剂盒利用明说书.docx

人去甲肾上腺素(NA)elisa试剂盒利用明说书

Elisakit规格：48孔配置/96孔配置

标准品稀释液：X1瓶

酶标试剂：3mlX1瓶(48)/6mlX1瓶(96)

【人去甲肾上腺素(NA)试剂盒】本试剂仅供研究利用

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在座标纸上绘出标准曲线，依照样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：

封板膜:2片(48)/2片

(96)

说明书:1份

密封袋:1个

标准品： 2700ng/L:

X1瓶X1瓶

2-8C保留

酶标包被板：1X48

1X96

2-8C保留

样品稀释液:3mlX1瓶

6mlX1瓶

2-8C保留

显色剂A液:3mlX1瓶

6mlX1瓶

2-8C保留

显色剂B液:3mlX1瓶

6mlX1瓶

2-8C保留

终止液： 3mlX1瓶

6mlX1瓶

2-8C保留

浓缩洗涤液：(20mlX20倍)X1瓶(20mlX30倍)X1瓶2-8°C保留实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人去甲肾上腺素(NA)水平。用纯化的人去甲肾上腺素(NA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入去甲肾上腺素(NA)，再与HRP标记的去甲肾上腺素(NA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过完全洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的去甲肾上腺素(NA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中人去甲肾上腺素(NA)浓度。

目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中去甲肾上腺素(NA)的含量。

效劳许诺：

供货期：款到发货。

工作时刻内免费的技术咨询和指导。请来电咨询

为客户提供来样检测效劳，最大限度实验结果的有效性(免费代测)。

保留条件及有效期：

试剂盒保留：2-8C|有效期：6个月

【人去甲肾上腺素(NA)试剂盒】样本处置及要求：

血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。认真搜集上清，保留进程中如显现沉淀，应再次离心。

血浆：应依照标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。认真搜集上清，保留进程中如有沉淀形成，应该再次离心。

尿液：用无菌管搜集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。认真搜集上清，保留进程

中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参如实行。

细胞培育上清：检测分泌性的成份时，用无菌管搜集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。认真搜集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右

（2000-3000转/分）。认真搜集上清。保留进程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本：切割标本后，称取重量。加入必然量的PBS，。用液氮迅速冷冻保留备用。标本融化后仍然维持2-8r的温度。加入必然量的PBS（），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。认真搜集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

标本搜集后及早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。假设不能马上进行实验，可将标本放于-20°C保留，但应幸免反复冻融.

不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中别离加标准品100|il，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50gl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100gl别离加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔别离加标准品稀释液50gl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50gl弃掉，再各取50gl别离加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中别离加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50gl别离加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中别离加标准品稀释液50gl，混匀后从第七、第八孔中别离取50gl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔别离加标准品稀释液50gl，混匀后从第九第十孔中各取50gl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50gl，浓度别离为1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L，150ng/L）。

加样：别离设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，