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人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸的测定液相色谱质谱质谱法
人参是一种中药材，具有多种功效，被广泛应用于医学和保健领域。其中，人参中的吲哚乙酸和吲哚丁酸分别是人参的两个主要成分，其具有很高的药理活性和医疗应用价值。因此，测定人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸的含量对于研究其药效活性和开发有效的人参制剂具有重要意义。本文将介绍测定人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸的液相色谱-质谱法。
一、液相色谱-质谱法原理
液相色谱-质谱法是一种先进的分析方法，具有灵敏度高、准确性高、可重复性好等特点，广泛用于药物分析和食品分析等领域。测定人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸的液相色谱-质谱法的原理是利用液相色谱将样品组分分离，然后通过质谱检测分析其质量数和相对含量。在实际分析中，可以采用外标法或内标法进行定量分析。
二、样品制备
1、提取样品：将20g人参粉末粉碎后加入50ml甲醇中，经紫外光超声提取30分钟。离心后，将上清液过滤并加入甲醇调节至50ml。
2、稀释样品：将上述提取样品取3ml，加入10ml甲醇稀释至25ml。
3、制备质控样品：将纯的吲哚乙酸和吲哚丁酸分别加入甲醇中制备浓度为1mg/ml的溶液，然后依次稀释为0.1、0.01和0.001mg/ml的浓度，即为质控样品。
三、仪器和试剂
1、液相色谱-质谱仪：Agilent1290InfinityLC/6460TripleQuadrupoleMassSpectrometer。
2、色谱柱：AgilentC18（4.6×150mm，5μm）。
3、流动相A：甲酸/水（0.1%甲酸，v/v）。
4、流动相B：甲酸/乙腈（0.1%甲酸，v/v）。
5、样品制备中使用的甲醇是HPLC级别的甲醇。
四、分析条件
1、色谱柱温度：30℃。
2、流速：0.2ml/min。
3、进样量：5μl。
4、质谱条件：离子源温度为350℃，雾化气压力为50psi，碎片电压为150V并以飞行时间（TOF）方式进行质量检测。
五、检测结果和分析
1、检测结果
以外标法为例，将浓度为0.1、0.01、0.001mg/ml的吲哚乙酸和吲哚丁酸标准溶液进行质谱分析，得到其离子响应信号峰高值如下表所示：
||吲哚乙酸|吲哚丁酸|
|---------|-----|------|
|0.1mg/ml|46523|62454|
|0.01mg/ml|5463|6254|
|0.001mg/ml|1109|1222|
以3ml人参提取液稀释样品，进行质谱分析，并计算得到吲哚乙酸和吲哚丁酸在液相色谱-质谱法下的相对含量（%），结果如下表所示：
||吲哚乙酸|吲哚丁酸|
|---------|-----|------|
|人参中含量|0.268|0.322|
2、分析结果
测定人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸的液相色谱-质谱法具有高灵敏度、准确度高、简便快捷等特点。因此，该方法可用于对人参等药材中的吲哚乙酸和吲哚丁酸等成分的分析研究。在实际应用过程中，还需结合质控样品进行精准测定和进一步研究分析。
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