2.8 重组子的鉴定.ppt

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主讲老师:邢煜骞重组子的鉴定

重组子真正含有预期重组DNA分子的转化子称为重组子。鉴定方法可分为以下两类:根据重组DNA分子检测结果鉴定重组子根据目的基因翻译产物蛋白质(酶)、多肽鉴定重组子

根据重组DNA分子检测结果鉴定重组子根据重组DNA分子大小鉴定重组子根据重组DNA分子酶切图谱鉴定重组子根据PCR扩增片段鉴定重组子采用DNA分子杂交法鉴定重组子采用DNA测序技术鉴定重组子

根据重组DNA分子大小鉴定重组子插入外源DNA片段的载体与原载体DNA分子之间有大小的差别。成功插入外源DNA未成功插入外源DNA

根据重组DNA分子酶切图谱鉴定重组子

根据PCR扩增片段鉴定重组子目的基因引物

采用DNA分子杂交法鉴定重组子Southern印迹杂交斑点印迹杂交菌落(或噬菌斑)原位杂交

采用DNA测序技术鉴定重组子

根据目的基因翻译产物蛋白质(酶)、多肽鉴定重组子蛋白质凝胶电泳法单向凝胶电泳双向凝胶电泳毛细管等电点凝胶电泳免疫检测法酶联免疫吸附法Western印迹法固相放射免疫法免疫沉淀法质谱分析法

蛋白质凝胶电泳法

酶联免疫吸附法(ELISA)

Western印迹法

质谱分析法

小结除了DNA和蛋白质,我们还可以通过检测什么物质来鉴定重组子?DNA蛋白质定义

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