DNA指纹技术及其应用.docx

DNA指纹技术及其应用

一、什么是DNA指纹

每个人体细胞内含有23对染色体，它们大小各异。遗传信息贮存于染色体内的DNA分子中。DNA中脱氧核苷酸排列方式叫序列，即一级结构。DNA序列中存在三种类型：单拷贝序列、中等程度重复序列和高度重复序列。重复序列就是一种序列在DNA分子中重复出现几百次、几千次、几万次甚至百万次，它们约占DNA总序列的3～4％。每个重复序列在300个核苷酸长度之内。

由于高度重复序列经超离心后，以卫星带出现在主要DNA带的邻近处，所以也被称为“卫星DNA”。卫星DNA中的重复序列单元则称为“小卫星DNA”。“小卫星DNA”具有高度的可变性，不同个体彼此不同。但“小卫星DNA”中有一小段序列则在所有个体中都一样，称为“核心序列”。如果把核心序列串联起来作为分子探针，与不同个体的DNA进行分子杂交，就会呈现出各自特有的杂交图谱，它们与人的指纹一样，具有专一性和特征性，因人而异，因此被称作“DNA指纹”(DNAfingerprint)。

二、DNA指纹的特点

特异性：研究表明，两个随机个体具有相同DNA图形的概率仅3×10－11，两个同胞个体具有相同图谱的概率也仅仅为二百万分之一(即2×10-6)。如果同时用两种探针进行比较，两个个体完全相同的概率小于5×10－19。全世界人口约50亿，即5×109。因此，除非是同卵双生子女，否则几乎不可能有两个人的DNA指纹的图形完全相同。

遗传性：DNA是人的遗传物质，其特征是由父母遗传的，DNA指纹区带遵循简单的孟德尔遗传方式。分析发现，DNA指纹图谱中几乎每一条带纹都能在其双亲之一的图谱中找到，只有0.4%的可能性，子女中的一条带在其父母中的图中不能找到(基因突变的结果)。

稳定性：即同一个体无病变的不同组织，如血液、肌肉、毛发、精液等产生的DNA指纹图形完全一致。

多位点性：高分辨率的DNA指纹图通常由15～30条带组成，看上去就像挂号信上的条码签一样。DNA指纹区中的绝大多数区带是独立遗传的。因此，一个DNA指纹探针能同时检测基因组中数十个位点的变异性。

三、DNA指纹技术的工作原理

将送检的各种生物学检样，如毛发、血痕、精斑、人体组织或白骨等，把其中所含的DNA提取出来。

选用与探针配对的限制性核酸内切酶，在长链DNA位置上加以切割，使分子量很大的DNA长链切短成许多长度不同的小片段。

在胶板尺寸较长的凝胶电泳仪中，对完全酶解后的DNA片段进行电泳，各酶切片段就会按其长度大小在电场中进行分离。

先用碱性溶液使凝胶板中分离开的双链DNA片段变性为单链片段，然后将凝胶板夹在尼龙膜中，使这些单链DNA片段印溃，转移并永久性地固定在尼龙膜上。

让放射性DNA探针与尼龙膜上的单链DNA片段进行分子杂交。

用放射性胶片与尼龙薄膜叠放，尼龙膜上的放射性探针便会发出X射线使胶片曝光，从而使杂交有探针的长度不同的DNA片段位置显影在胶片上。这样的特征DNA片段条状图谱，便是所谓的DNA指纹（如下图）。

四、DNA指纹技术的应用

DNA指纹用途很广泛，下面介绍其在法医学中的主要作用：

在刑事案件中的应用

在法医学上，如果确定某人是嫌疑犯，则可提取其血样或毛发的DNA，做出DNA指纹，然后由犯罪现场残留的血、精液、唾液、痰液、毛发、骨骼或其他肉体成分提取的DNA指纹相对照。若两者一样，则称其指纹相配，证明该嫌疑犯就是作案的罪犯，反之则否。通常进行上述指纹相配的签定叫“配型”工作。

在亲子鉴定中的应用

自从杰弗里斯等人于1985年首次对一起移民纠纷中的母子关系作出肯定鉴定以来，用DNA指纹术进行亲子鉴定已有近10年的历史了。代表性的报道有：在一起无名尸的鉴定过程中，专家们将提取到的腐尸残血中的DNA，和假定受害人双亲的DNA进行DNA指纹鉴定后，成功地对这具无名尸的人身作出了鉴定。在常规血清学检验不能对亲子关系作出肯定结论的情况下，采用DNA指纹术便可轻易地作出结论。

事故受难者残骸鉴定

在空难、火灾、地震等灾难事故中，单纯依靠法医学和常规法血清学检验，是很难对所有遇难人员的残骸加以区分的。因此，在常规手段行不通时，采用DNA指纹技术已成为最佳选择。

人种、性别鉴定

研究表明，DNA指纹术可在相当大程度上用于人种鉴定，并测出白种人和非洲黑人的DNA多态片段及它在特定范围内的出现频率，具有种属代表性。有人对长达20年的陈旧血迹中的降解DNA进行了性别鉴定，并在人、兽的区分鉴定中取得成功。