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实验二十 日本血吸虫病实验室诊断技术.pdf

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实验二十日本血吸虫病实验室诊断技术

日本血吸虫病是一种人畜共患的寄生虫病,被世界卫生组织列为全球重点防治疾病之一。它严重威

胁着疫区人和动物的健康和生命安全,给畜牧业带来巨大的经济损失。在我国,本病严重流行于长江流

域及其以南13个省、市、自治区。家畜如牛、羊、猪感染日本血吸虫后,不仅祸害自身,更重要的是

作为人体血吸虫病的要保虫宿,为播本病起了重要作用。大量调查研究表明,家畜是血吸虫病流

行最要的染源和污染源。控制染源是综合防治疫病、扑灭疫情的重要环节,而控制染源的前提

是确诊染源。因此,应用灵敏、快速、经济的诊断方法确诊染源,己成为日本血吸虫病流行病学调

查、疫情监测、以及控制其流行和扑灭疫情必需解决的问题,这样才能到有的放矢,减少在人力、物

力和财力等方面的浪费。

当前对于日本血吸虫病的诊断方法已有大量的报道,根据本科教学的需要,下面介绍几种本科阶段

应该掌握或者需要了解的实验室常用的日本血吸虫病诊断方法。

一、实验目的及要求

1.熟悉日本血吸虫卵和毛蚴的形态特征。

2.掌握血吸虫病虫卵检查方法。

3.掌握血吸虫病毛蚴孵化方法。

4.了解血吸虫病的几种常见的血清学(免疫学)诊断方法。

二、实验器材

(一)病原学诊断

1.直接涂片法。

()检验材料:新鲜动物粪便;

1

()试剂:甘油水溶液或普通水;

250%

()器材:载玻片、滴管、盖玻片、显微镜。

3

2.沉淀法。

()检验材料:新鲜动物粪便;

1

(2)试剂:普通水;

(3)器材:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛、滴管、金属环、载玻片、显微镜(普通离心机)。

3.浮集法。

()检验材料:新鲜动物粪便;

1

(2)试剂:普通水、饱和食盐水、33%的硫酸锌溶液;

(3)器材:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛(目/英寸)、滴管、金属环、载玻片、显微镜。

60

4.毛蚴孵化法。

()检验材料:新鲜动物粪便;

1

()试剂:约,温度约℃的灭菌自来水脱氯处理;

2pH6.8-7.220-30()

()器械:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛(目英寸)、尼龙筛网兜(目英寸)、塑料

340/260/

袋、长颈烧瓶(或三角瓶)()、脱脂棉、天平、温箱。

500ml

(二)血清学(免疫学)诊断

.环卵沉淀试验()。

1COPT

()检验材料:新鲜动物血清;

1

()试剂:血吸虫冻干虫卵、标准阳性血清、标准阴性血清;

2

()器材:滴管、载玻片、盖玻片(×)、蜡杯(熔蜡用)、玻璃蜡笔、脱脂棉、有盖盘、

32424mm

酒精灯、温箱、计数器、显微镜。

.间接血凝试验法()。

2IHA

()检验材料:动物血清;

1

()试剂:生理盐水、蒸馏水、血吸虫病血凝抗原、标准阳性血清、标准阴性血清;

2

()器材:96孔微量血凝板、25μl和100μl微量移液器。

3

.胶乳凝集试验()。

3LA

()检验材料:动物血清;

1

()试剂:血吸虫病快诊液、标准阳性血清、标准阴性血清、生理盐水、蒸馏水、磷酸盐

2PAPS

缓冲液()();

PBSpH7.2

()器材:×16cm玻璃凝集反应板、25μl和100μl微量移液器、手术剪刀、洁净纸、冰箱、

3

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