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实验二十日本血吸虫病实验室诊断技术
日本血吸虫病是一种人畜共患的寄生虫病,被世界卫生组织列为全球重点防治疾病之一。它严重威
胁着疫区人和动物的健康和生命安全,给畜牧业带来巨大的经济损失。在我国,本病严重流行于长江流
域及其以南13个省、市、自治区。家畜如牛、羊、猪感染日本血吸虫后,不仅祸害自身,更重要的是
作为人体血吸虫病的要保虫宿,为播本病起了重要作用。大量调查研究表明,家畜是血吸虫病流
行最要的染源和污染源。控制染源是综合防治疫病、扑灭疫情的重要环节,而控制染源的前提
是确诊染源。因此,应用灵敏、快速、经济的诊断方法确诊染源,己成为日本血吸虫病流行病学调
查、疫情监测、以及控制其流行和扑灭疫情必需解决的问题,这样才能到有的放矢,减少在人力、物
力和财力等方面的浪费。
当前对于日本血吸虫病的诊断方法已有大量的报道,根据本科教学的需要,下面介绍几种本科阶段
应该掌握或者需要了解的实验室常用的日本血吸虫病诊断方法。
一、实验目的及要求
1.熟悉日本血吸虫卵和毛蚴的形态特征。
2.掌握血吸虫病虫卵检查方法。
3.掌握血吸虫病毛蚴孵化方法。
4.了解血吸虫病的几种常见的血清学(免疫学)诊断方法。
二、实验器材
(一)病原学诊断
1.直接涂片法。
()检验材料:新鲜动物粪便;
1
()试剂:甘油水溶液或普通水;
250%
()器材:载玻片、滴管、盖玻片、显微镜。
3
2.沉淀法。
()检验材料:新鲜动物粪便;
1
(2)试剂:普通水;
(3)器材:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛、滴管、金属环、载玻片、显微镜(普通离心机)。
3.浮集法。
()检验材料:新鲜动物粪便;
1
(2)试剂:普通水、饱和食盐水、33%的硫酸锌溶液;
(3)器材:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛(目/英寸)、滴管、金属环、载玻片、显微镜。
60
4.毛蚴孵化法。
()检验材料:新鲜动物粪便;
1
()试剂:约,温度约℃的灭菌自来水脱氯处理;
2pH6.8-7.220-30()
()器械:专用乳白色塑料粪杯、竹筷、铜筛(目英寸)、尼龙筛网兜(目英寸)、塑料
340/260/
袋、长颈烧瓶(或三角瓶)()、脱脂棉、天平、温箱。
500ml
(二)血清学(免疫学)诊断
.环卵沉淀试验()。
1COPT
()检验材料:新鲜动物血清;
1
()试剂:血吸虫冻干虫卵、标准阳性血清、标准阴性血清;
2
()器材:滴管、载玻片、盖玻片(×)、蜡杯(熔蜡用)、玻璃蜡笔、脱脂棉、有盖盘、
32424mm
酒精灯、温箱、计数器、显微镜。
.间接血凝试验法()。
2IHA
()检验材料:动物血清;
1
()试剂:生理盐水、蒸馏水、血吸虫病血凝抗原、标准阳性血清、标准阴性血清;
2
()器材:96孔微量血凝板、25μl和100μl微量移液器。
3
.胶乳凝集试验()。
3LA
()检验材料:动物血清;
1
()试剂:血吸虫病快诊液、标准阳性血清、标准阴性血清、生理盐水、蒸馏水、磷酸盐
2PAPS
缓冲液()();
PBSpH7.2
()器材:×16cm玻璃凝集反应板、25μl和100μl微量移液器、手术剪刀、洁净纸、冰箱、
3
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