《生物电泳分离技术》课件.pptxVIP

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生物电泳分离技术制作人:时间:2024年X月

目录第1章生物电泳分离技术简介

第2章凝胶电泳

第3章毛细管电泳

第4章等电聚焦电泳

第5章生物电泳分离技术在蛋白质分离中的应用

第6章总结与展望

01第1章生物电泳分离技术简介

什么是生物电泳分离技术?生物电泳分离技术是一种常用的分离和纯化生物大分子的方法,主要利用带电生物大分子在电场中的迁移速度不同而实现其分离。其历史可以追溯到20世纪30年代,目前已经成为生物技术领域最重要的实验室技术之一。

生物电泳分离技术的应用领域基因分型蛋白质分析核酸分离和纯化病毒检测

琼脂糖凝胶电泳0103多态性凝胶电泳02聚丙烯酰胺凝胶电泳

缺点样品损失

较低的准确性

样品处理时间较长发展前景技术不断升级

应用领域不断扩展

诊断与治疗的重要手段生物电泳分离技术的优缺点优点高分辨率

灵敏度高

操作简单

等电聚焦电泳的原理与应用等电聚焦电泳是一种电泳分离技术,利用电泳胶中的等电点与样品等电点的差异,实现酸碱度不同的生物大分子的分离。其应用领域广泛,如蛋白质研究、糖类组分的分析等。

毛细管电泳的发展历程20世纪60年代,理论提出20世纪70年代,首次成功实现20世纪80年代,应用领域不断发展20世纪90年代以后,技术逐渐成熟

实验室常用的生物电泳分离技术设备常用的生物电泳分离技术设备包括凝胶电泳设备、毛细管电泳设备、等电聚焦电泳设备等,其中凝胶电泳设备是最常用的分离和纯化生物大分子的设备之一。

02第2章凝胶电泳

原理及类型静态凝胶电泳原理动态凝胶电泳等电点聚焦电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶状物质中的高分子网格工作原理电场的作用制备凝胶操作流程样品制备

电泳板制备问题0103电泳条件与运行问题02样品加载问题

事故应急措施关闭电源

立即报告主管安全操作与事故应急措施安全操作戴手套和护目镜

在电泳室外穿着实验服

静态凝胶电泳原理静态凝胶电泳是将高分子溶液制作成凝胶,将待测样品置于凝胶中,利用电场将样品分离的方法。

动态凝胶电泳凝胶电泳基础上引入交替电场原理可分离DNA和蛋白质

等电点聚焦电泳等电点聚焦电泳是利用不同分子电荷的物质在电场中移动的速度不同的原理,将酸性和碱性氨基酸分开的方法。

03第3章毛细管电泳

基本原理毛细管电泳是一种利用毛细管作为电泳槽进行分离的技术。其基本原理是根据分子的电荷、大小、形态等差异来将样品中的生物大分子分离出来。

分类工作原理毛细管凝胶电泳操作流程毛细管凝胶电泳

毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳是一种利用毛细管和凝胶作为电泳槽进行分离的技术。其工作原理是根据样品中分子的大小和形态差异,经由凝胶滤网的筛选,达到分离的目的。

毛细管凝胶电泳工作流程毛细管凝胶电泳的操作流程主要包括:样品预处理、样品注入、电泳分离、检测和数据分析。

毛细管毛细管电泳1.毛细管内置电极产生电场工作原理2.样品在电场影响下分离工作原理1.样品预处理操作流程2.注射样品操作流程

毛细管毛细管电泳毛细管毛细管电泳是一种基于毛细管电动效应,利用毛细管及样品中的离子在电场力的作用下发生电移动而进行的分离技术。

毛细管电泳常见问题及解决方法1.电泳背景噪音电泳背景噪音问题2.噪音来源分析电泳背景噪音问题1.样品的量样品预处理问题2.样品的稀释比样品预处理问题

04第4章等电聚焦电泳

原理及分类等电聚焦原理原理等电聚焦电泳分类分类

聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳是利用聚丙烯酰胺凝胶作为分离载体,通过电泳的方式将混合样品中的蛋白质分离出来。其中,聚丙烯酰胺凝胶是一种由交联聚丙烯酰胺形成的凝胶,具有孔径大小的分布,在电场作用下可以使分子按大小分离。工作原理

等电聚焦电泳常见问题及解决方法电泳时间、电流密度、电解液配比等参数误差操作误差问题多种蛋白质混合,不同等点蛋白质混合等问题非特异性问题聚丙烯酰胺凝胶浓度、交联剂用量等因素影响分辨率分辨率问题

非线性梯度等电聚焦电泳工作原理:非线性梯度等电聚焦电泳利用电场作用下样品中的蛋白质在非线性梯度pH值梯度中移动,实现精细分离。

应用领域:常用于蛋白质分离、鉴定、纯化等。高分辨率等电聚焦电泳工作原理:高分辨率等电聚焦电泳是一种能够实现高通量、高灵敏度分析的技术,利用等电点不同的蛋白质在pH梯度中进行分离。

应用领域:常用于蛋白质组学、临床检验等领域。二维等电聚焦电泳工作原理:二维等电聚焦电泳是将蛋白质按照等电点分离,在pH梯度胶上沿电泳方向移动后再按照分子量分离。

应用领域:常用于蛋白质鉴定、纯化等方面。等电聚焦电泳分类旋转双向电场等电聚焦电泳工作原理:旋转双向电场等电聚焦电泳利用旋转电场和双向电场的交替作用将蛋白质分离。

应用领域:常用

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