丙肝病毒的分子生物学检测.pptx

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丙肝病毒的分子生物学检测

问题2020年诺贝尔奖:为何发现丙肝病毒如此重要?我们中国人对丙肝研究的贡献都有什么?(提示:抗丙肝新药戈诺卫即达诺瑞韦)

丙型肝炎病毒HepatitisCvirus,HCV母婴垂直传播。性接触传播。123血液传播。传播途径

急性丙型病毒性肝炎多数无黄疸,ALT升高,恶心,全身无力等,如果感染者免疫力好,可以在短时间内迅速的清除病毒,丙肝病毒抗原转为阴性。临床表现丙型肝炎病毒HepatitisCvirus,HCV

临床表现慢性丙型病毒性肝炎疲劳,腹胀等,也可无症状,ALT反复波动,HCVRNA持续阳性,肝活检可见慢性肝炎表现,可发现肝硬化。丙型肝炎病毒HepatitisCvirus,HCV

临床表现肝硬化感染HCV20~30年,有10%~20%患者可发展为肝硬化,1%-5%患者会发生肝细胞癌,导致死亡。丙型肝炎病毒HepatitisCvirus,HCV

体毛少肌肉萎缩腹水蜘蛛状血管瘤肝掌(红色)黄疸海蛇头样血管扩张临床表现丙型肝炎病毒HepatitisCvirus,HCV肝硬化

丙肝病毒的结构特征50纳米包膜糖蛋白E1RNA核心蛋白包膜糖蛋白E2囊膜

丙肝病毒的基因组特征结构蛋白非结构蛋白9.5kbCE1NS1/E2NS2NS3NS4NS5P75’UTR3’UTR电镜下的HCV

丙肝病毒的基因组特征1234NS2蛋白疏水性很强,与细胞膜相伴。NS3蛋白是多功能蛋白,有强免疫性。NS4a能辅助NS3蛋白酶活性的表达。NS4b在HCV复制酶复合体的装配中起作用。NS5a是HCV复制酶复合体的成分,与宿主蛋白相互作用。5NS5b参与病毒RNA的合成。76p7编码一种膜内在蛋白,与离子通道有关。

HCV呈现三个水平的遗传变异丙肝病毒的基因分型型:各型核酸序列之间相差30%-35%;亚型:序列之间相差20%-25%;准病毒株:序列之间相差1%-10%。核酸序列变异

丙肝病毒的基因分型HCV分为6种基因型以及100多个亚型。1、2、3型全球分布,4型主要在北非和中东国家,5型主要分布于南非,6型流行于东南亚。HCV的6种基因型起源于500-2000年前不等,亚型起源于70-200年前,可见这些变异是一点一滴长期积累的结果。HCV的5’UTR、3’UTR、C区变异较小。E1、E2等区有较高变异性,尤其是E2区有高度的变异性。

丙肝病毒的分子生物学检测方法检测HCV抗体用核心蛋白NS3、NS4、NS5区等非结构蛋白作为抗原,通过ELISA法,放射免疫法检测抗HCVIgG或IgM。若抗HCVIgM阳性可对HCV感染进行早期诊断,检出率可达90%以上。

丙肝病毒的分子生物学检测方法检测HCV基因12RT-PCR设计C、NS3、NS5保守区引物,定性检测HCV。Real-timePCR定量检测HCV。RT-PCR反应

3基因芯片应用DNA杂交技术,大规模分型和检测HCV。结果杂交基因芯片丙肝病毒的分子生物学检测方法检测HCV基因

小结AddYourTitleHCV的传播途径包括血制品、母婴和性传播。HCV是RNA病毒,编码的结构性蛋白包括C、E1、E2,非结构蛋白包括NS2、NS3、NS4、NS5。HCV分子检测方法主要包括用NS3、NS4、NS5区作为抗原进行ELISA检测,也可用PCR定性、Real-timePCR定量检测HCV。

思考题丙肝的发现、治愈是人类医学史上的一个里程碑。那么在人类对抗“瘟疫”的历史上,我们中国人做出了什么贡献呢?(比如:2019年的新冠肺炎,中国首先提出了有效的病毒传播阻断方法。)

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