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杂交兰种苗组培快繁技术规程

1范围

本文件规定了杂交兰种苗组培扩繁的组培苗培养、组培苗驯化移栽、质量等级、包装、标签和运输

的要求。

本文件适用于杂交兰种苗组培扩繁至驯化栽培的生产过程。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则

NY/T496—2010肥料合理使用准则通则

NY/T1276—2007农药安全使用规范总则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

杂交兰Cymbidiumhybrid

由国兰和大花蕙兰种间杂交选育的一类兰花杂交种。

类原球茎protocorm-likebodies

兰花外植体诱导培养时，茎尖生长点组织逐渐膨大形成的、可发育成完整试管苗的扁形球状物。

4组培苗培养

外植体的选择和处理

4.1.1母株的预处理

于春秋季，宜使用50%多菌灵可湿性粉剂800倍液等广谱杀菌剂，对长势均匀、无病虫害且带有新

生芽的健康母株进行灌根处理，每隔3天1次，连续处理2次～3次，放置于通风良好、清洁、干燥的

环境，温度宜15℃～25℃，光照宜8000lux～12000lux。

4.1.2外植体的选取

母株基质干透后，选择苞叶尚未展开、露出基质表面2cm～6cm的新生芽，从基部切断取下，置

于无菌样品袋中带回实验室。

1

4.1.3外植体消毒

4.1.3.1用洁净的软毛刷轻刷外植体表面，去除表面污垢，浸入洗洁精等清洁剂中震荡清洗50min～

80min，再流水充分冲洗，置于超净工作台上。

4.1.3.2剥去1片～2片外苞叶，75%酒精浸泡消毒90s，无菌水清洗2次～3次。

4.1.3.3再剥去1片～2片外苞叶，浸入10%NaClO溶液，加入2滴～3滴吐温20，处理10min，无

菌水清洗3次～4次。

4.1.3.4浸入0.1%HgCl溶液，加入2滴～3滴吐温20，根据芽的大小灭菌15min～17min，无菌水

2

清洗5次～6次。

4.1.3.5再剥去1片～2片外苞叶，将剥离的芽浸入0.05%HgCl溶液中消毒60s，无菌水清洗5次～

2

6次。

初代培养

4.2.1接种

取消毒后的芽，剥离0.3cm～0.5cm的茎尖组织接种于初代培养基诱导类原球茎。

4.2.2培养基

培养基配方宜为：1/2MS+1mg/L6-BA+1mg/LIBA+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L琼

脂，pH值5.6～5.8。

4.2.3培养条件

光照16h/d，光照强度500lux～1000lux，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。

继代培养

4.3.1转接

初代培养60d后，将诱导形成的类原球茎分割为体积约0.4cm×0.4cm×0.4cm的团块，接

种于继代培养基上，每隔60d～75d继代一次，分割时去除类原球茎上分化的芽和根，继代次数不宜

超过12代。

4.3.2培养基

培养基配方宜为：Hyponex1（花宝1号）+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+50g/L香蕉泥+2

g/L水解酪蛋白+1g/L活性炭+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值5.6～5.8。

4.3.3培养条件

光照16h/d，光照强度500lux～1000lux，温度（25±1）℃；暗培养时温度为（20±1）℃。

分化培养

4.4.1转接

将增殖的类原球茎分割为体积约0.4cm×0.4cm×0.4cm的团块，转接至分化培养基上分化

成芽，类原球茎之间的距离不宜少于1.5