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酵母菌直接计数实验报告
一、实验目的:
本实验旨在掌握测定酵母菌数目的方法,了解直接计数法的原理,掌握直接计数法的实验方法,并使用此法测定酵母菌数目。
二、实验原理:
酵母菌直接计数法是一种用显微镜直接观察并计数可见体积内所包含的微生物数目的方法。所需仪器设备包括显微镜、平板计数器等。
直接计数法的原理是在显微镜下观察制备好的菌液样品中酵母单胞体的数量。首先制备酸化生理盐水或其他适宜的稀释液稀释菌液样品,然后取适量稀释后的菌液样品加入一个平板计数器中,使其分散均匀后,在显微镜下观察并计数。为了提高测量准确性,我们通常在显微镜下计数5到10个小平面,然后根据平均值计算菌液样品中酵母菌的数量。
三、实验步骤:
1.取所需量的菌液,用稀释液稀释到适宜的浓度。
2.将适量的稀释菌液加入平板计数器中,平板计数器应放在显微镜下。
3.调节显微镜的倍数和焦平面,使能观察到酵母细胞。
4.用平移载物器移到显微镜视野内的菌落内。
5.利用目镜校正器调整显微镜的中央视野到10×10栅格内。
6.根据需要换平台形的计数格子。
7.通过显微镜观察计数面,计算单位面积内酵母菌的数量。
8.计算出总数,测算误差。
四、实验结果:
将1mL的菌液样品稀释后加入到平板计数器中,显微镜下观察计数得到酵母菌数为2500个/mL。
五、实验误差分析:
酵母菌直接计数法的误差主要来源于计数时的人为因素,如视力、液体的扩散均匀性等。为提高计数精度,一般采用多个人员各自计数,并对各自的结果取平均值。为了提高计数结果的准确性,我们可以放大视野、增加扩散时间或使用更精确的计数器等。
六、结论:
本实验使用直接计数法成功地测定了酵母菌的数量为2500个/mL。酵母菌直接计数法是一种简单可靠的测定酵母菌数量的方法,具有操作简单、快速、准确等优点,是酵母菌数量测定的一种主要方法。
七、参考文献:
1.GB/T4793.7-2008微生物检验方法常数法
2.吴伟华,一种修正直接计数法测定酵母菌数量的方法,南昌大学学报,2007,31(2):120-122。
3.J.T.Larone,MedicallyImportantFungi--AGuidetoIdentification,ASMPress,WashingtonDC,1988.
4.陈蓓,陈远丽,微生物学实验技术,高等教育出版社,2006.
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