液相色谱柱保养与维护 液相色谱维护和修理保养.pdf

液相色谱维护和修理

保养

每天用充分的时间来维护色谱柱，您将节省更多用于处理色谱

柱故障的时间，同时您的色谱柱的寿命也会变得更长！色谱柱的使

用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关外，紧要的

是与日常的维护紧密相关。色谱柱的使用寿命紧要是依据柱效和柱

压两个指标来衡量，假如一支色谱柱柱效太低或柱压太高，通常被

认为该色谱柱的使用寿命已经结束。因此，延长色谱柱使用寿命的

关键是，除去引起柱效下降和柱压上升的因素。通过以下几点帮忙

您完成色谱柱的日常维护工作。

流动相的pH值

由于硅胶基质的填料中存在Si—C和Si—O键，流动相超过其

pH范围将会导致硅胶基质溶解和键合相碳链断裂，使柱效下降，寿

命变短。由于流动相的pH掌控不当而对色谱柱造成的损害，通常很

难使色谱柱恢复，因此必需认真对待，严格掌控流动相的pH值。

去除样品和流动相中的固体颗粒

样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板，筛板

被堵不仅会引起柱压上升，而且也会引起柱效下降，由于筛板的堵

塞会引起液流不均，导致色谱峰形拖尾、变宽，甚至显现双峰，从

而使柱效下降。因此，建议使用超纯水和色谱纯试剂，在分析前对

1页共15页

0.45m滤膜，尤其是流动相加

入了缓冲盐（如NaH2PO4等），必需过滤。

博纳艾杰尔为您供应了一系列高质量的过滤产品，外壳接受聚

丙烯材料，滤膜为意大利进口。种类有：混合纤维素（MCM）、尼龙

（Nylon）、聚四氟乙烯（PTFE）、聚偏氟乙烯（PVDF）、聚醚砜

（PES）、加强型纤维素膜（Reg.Cellulose）、玻璃纤维、PP等，

常用规格为：直径13mm、25mm、33mm；孔径：0.45m、0.22m等。

使用保护柱或在线过滤器

样品和流动相经过滤后并不能完全除去固体颗粒物质，由于泵

的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物，这些固体颗粒

被流动相带入色谱柱，堵塞筛板，导致柱压上升、柱效下降。保护

柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱筛板孔径相同，因此

可以阻拦固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。

由于柱压上升在分析故障中占很大比例，因此，除对样品和流动相

进行过滤外，建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。

正确使用缓冲盐

缓冲液可以供应离子平衡的反离子，并使流动相保持确定的离

子强度和pH值，削减拖尾。缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶

剂，因此缓冲盐使用不当会致其析出，堵塞填料基质上的微孔和颗

粒间的空隙，使填料板结，柱压上升；同时阻拦了基质上键合的碳

链自由伸展，使色谱柱的保留本领下降，柱效降低。缓冲盐析出后，

2页共15页

别紧要。

正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，因此正确使用缓冲

盐的方法可归结为一句话：使用前要过渡，使用后要冲洗。

实在方法如下：

a.等度条件：使用缓冲盐前用过渡流动相以1.0mL/min流速

冲洗20—30倍柱体积，然后再使用含有缓冲盐的流动相；使用后去

除缓冲盐的方法是用过度流动相以1.0mL/min流速冲洗30倍柱体积，

然后以纯有机溶液冲洗30倍柱体积保存。

b.梯度条件：用含有缓冲盐的流动相进行梯度洗脱之前，用与

初始流动相构成相同的过渡流动相以1.0mL/min流速冲洗30倍柱体

积，再开始梯度的运行；分析完成后，再用过渡流动相以

1.0mL/min冲洗色谱柱30倍柱体积，然后以纯有机溶液冲洗30倍

柱体积保存。

另外，在使用缓冲液的过程中还要注意以下几点：

3页共15页

a.避开使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用；

b.缓冲液需现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培育液，隔天

或放