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专题一:植物专题
试验一植物细胞有丝分裂的制片与观测
摘要:本试验选用大蒜作为试验材料,通过对大蒜根尖的培养获得生长旺盛的植物分生组
织,然后对根尖细胞进行前处理、固定、解离、染色、压片来观测细胞有丝分裂的全过程。
关键词:有丝分裂间期前期中期后期末期
ofthemitosis.
etelopha
试验原理
有丝分裂是植物体细胞进行的一种重要分裂方式。有丝分裂的目的是增长细胞的数量而使
植物有机体不停生长。在有丝分裂过程中,细胞核内的物质能精确的进行复制,然后有规律的
均匀分派到两个子细胞中去。植物有丝分裂重要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其他分生组
织里进行。将生长旺盛的植物分生组织经取材,固定、解离、染色、压片,可以观测到细胞有
丝分裂的全过程。
试验用品
1的比例配置),1mo1/1的hc1,石炭酸品红,水浴锅,显微镜,剪刀,矿泉水瓶,蒸馏水
试验环节
1.生根、取材与固定
采用水培法于暗处使大蒜生根,每天换水两次。4天后,根长至2.0cm左右。上午
10:00用剪刀将根尖剪下,并直接放入固定液中固定,以保持细胞真实的生活状态,防止操作过
程中对细胞生活状态的破坏。本次试验固定期间为14h。
2.解离与水洗
本次试验采用了酸解法使细胞散开。将1mo1/1的hc1放入60℃的恒温水浴锅中,将
固定好的根尖放入.解离4min。用清水冲洗解离后的材料5次,洗去表面的hc1,并引起后低
渗,利于压片。
3.染色、压片与镜检、拍照
截取根尖上分生组织1/3左右于载玻片上,用镊子将分生组织碾碎;滴上石炭酸品红染
色5min。染完后,盖上盖玻片,用解剖针轻敲盖玻片几次,以增强细胞扩散程度。试验成果
通过上述试验措施获得了一系列分裂的照片,如图i-1所示。从这一系列图片我们可以
看到有丝分裂是一种持续的过程,各期的特性如下所述:
染色质缠绕成丝状的无规线团。
前期(prophase):图i-1(b)所示,染色体螺旋化,由无规线团逐渐变成比较清晰的
染色体,核膜核仁消失。
目清晰,是染色体形态观测的最佳时期。
解螺旋,由染色体状态逐渐变为无序线团,核膜核仁复现。
由于此时是大蒜分裂的高峰期。
2、解离的时间要合适,大概4min,由于解离时间的长短与试验成果的好坏有非常直接
的影响,时间过长,则不仅破坏分生组织之间的果胶与纤维素等物质,也使分生组织与伸长区
脱离,染色效果将会减少,而过短,则又达不到分离细胞的成果。
3、在切取根尖时大概切从根尖开始算往上1.5mm左右,若切得太短,则只会看到成熟的
根冠细胞,在视野中看不到分裂期细胞;若切得太长,则会看到有诸多伸长区的成熟细胞,从
而影响试验成果。
4、染色时间不合适过长或过短,染色过深或过浅都会影响最终的试验成果。
5、压片时用拇指从上往下垂直用力且要防止载玻片与盖玻片之间的滑动,否则会使细胞
之间重叠,影响观测。
6、观测时先用低倍镜找到分裂相的位置,再换高倍镜观测
试验二植物细胞减数分裂的制片与观测
摘要:本试验选用玉米雄花作为试验材料,首先将已固定好雄花的花药剥离出来,然后通
过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观测细胞减数分裂的全过程。
关键词:减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期
ofthemeiosis.
onemadiakineses
试验原理
减数分裂是生物在形成配子时的一种特殊的分裂方式,是在性母细胞中进行的。减数分裂
产生的每个子细胞染色体数目减少二分之一。并且第一次分裂前期尤其长,其变化尤其复杂,
包括同源染色体配对、互换与分离等。
试验用品
比例配置),铁矾,苏木精,恒温箱,冰乙酸,酒精灯,显微镜
试验措施
1、取材与固定(指导老师完毕)
采集处在减数分裂时期的玉米雄花,采集时间为上午8:30—10:30和下午2:00-
4:00。采集的雄花直接放入新配制的carnoy固定液中固定一周(中间换固定液两次)。
2、花药剥离
减数分裂是同步分裂,由于每朵小花中的所有花药都处在同一时期,因此剥离的量要充足,
以便在试验中能进行选择。
3、媒染、复染花药
在不伤害花药的前提下,使用镊子与解剖针玻璃花药并放入4??酸高铁铵(铁矾)水溶液
中进行媒染,时间为4-24h。媒染后,彻底水洗除净花药表面的铁离子。之后放入0.5??苏
木精中染4—24h。在25℃箱中进行。染完后再次彻底水洗。除去表面染料。
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