荧光定量PCR技术在临床检测中的应用专家讲座.pptx

荧光定量PCR技术在

临床检测中应用;

;;九十年代中期PCR临床应用在国内全方面展开

1998年荧光定量PCR技术开始在中国应用于临床检测

;;

灵敏度高

快捷

简便

对样品纯度要求低

能够相对定量

;Ct值意义;感染性疾病诊疗

母婴传输控制与观察

遗传疾病诊疗

肿瘤诊疗

法医学判定;早期诊疗

病情评定和预后判断

抗病毒药品疗效观察、指导

新药验证;一感染性疾病

1.病原体含量与病情之间关系

2.病原体含量与用药之间关系

3.药品及疗法研究与开发

4.新病原体分子诊疗标准

5.新愈后指标

6.传染病发病监控、预测与预防

;临床应用;三遗传病

1.等位基因检测

2.多基因遗传病突变检测

3.基因表示异常所致遗传病检测

;荧光定量PCR在病原体检测中应用;肝炎病毒定量检测

HBV

HCV;（一）乙型肝炎病毒结构及特点;HBV;

3.血清学指标(－)不能排除HBV感染。

;HBV;HBV感染与干扰素治疗;HBV感染与干扰素治疗;HBV感染与干扰素治疗;;拉咪呋啶：

有显著降低高病毒载量作用，近期疗效颇有优势，不过长久使用可造成HBV变异，患者易出现耐受性，而且轻易出现停药后反弹。

;0

-20

-40

-60

-80

-100;HBV;病毒特点：

1.单正链RNA病毒

2.E1和E2区基因高度变异性;(二)HCV-RNA定量检测临床意义;HCV;二常见性传输疾病病原体;艾滋病;艾滋病是一个有明确病原体可经过人之间一定传输路径传输慢性传染病，属于《传染病防治法》中要求乙类传染病

;HIV病毒：多亚型和多变异;艾滋病病毒在外界抵抗力;

;艾滋病诊疗;荧光定量PCR应用为艾滋病初筛和辅助

检验提供了有力工具;NGH;CT;UU;1.非培养或形态学检验诊疗技术，快速、特异、敏感。

2.对无症状或症状轻者，能够早期确诊。

3.对NGH、CT、UU等混合感染者，诊疗和判别诊疗。

4.指导用药、考评疗效。

;NGH/CT/UU;人乳头瘤病毒感染与致病;人乳头瘤病毒感染与致病;HPV;1.对经典病例能够明确诊疗。

2.对临床表现和组织病理改变都不经典病例一样能够做出诊疗。

3.对亚临床和隐性HPV感染做出诊疗。

4.基因分型。

5.考评疗效与预后。

6.病毒载量与患癌症风险。

;HPV;手足口病（hand-foot-mouthdisease，HFMD）;HFMD病原;人肠道病毒感染普通致病机制;致病特点

;中国HFMD流行;加强HFMD病原检测和监测十分必要;手足口病试验室检测;;三结核杆菌与呼吸道病原体检测;结核杆菌流行现实状况（1）;结核杆菌流行现实状况（2）;结核杆菌引发感染;常规结核病试验室诊疗方法及不足;荧光定量PCR检测TB-DNA意义;3.荧光定量PCR检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和改良罗氏培养法。

4.TB-DNA浓度可用于判断疗效：

痰标本中结核杆菌数量呈逐步下降趋势，TB-DNA拷贝数下降。依据病原体DNA浓度，对药品治疗及疗效观察提供参考依据;CP、MP感染可致咽炎、支气管炎和肺炎，潜伏期约2-3周，通常起病较迟缓。连续性咳嗽。;荧光定量PCR用于非经典性肺炎诊疗;甲型H1N1流感;“猪流感”更名为“甲型H1N1流感”

世界卫生组织4月30日宣告，从当日起，该组织不再使用“猪流感”一词指代当前疫情，而开始使用“A（H1N1）型流感”一词。与之相对应，我国官方文件从5月1日起相继用“甲型H1N1流感”代替原来“人感染猪流感”。

世界卫生组织讲话人说，之所以更改叫法，是因为“猪流感”一词轻易误导消费者，美国和墨西哥等国猪肉及猪肉制品已显著受到其它国家进口禁令影响。

世界卫生组织申明说，依据当前掌握科学依据，此次流行病毒仅在人际间传输，尚无证据表明它在猪群内传输，或由猪向人传输，也无证据表明人因食用猪肉或相关产品染病。

;病原学;;流行病学特点;易感人群

普遍易感。患者多多年纪在25岁至45岁之间，当前报道以青壮年为主，应注意老人和儿童。

;临床表现;部分患者病情可快速进展，来势凶猛、突然高热、体温超出39℃，甚至继发严重肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞降低、肾功效衰竭、败血症、休克及Reye综合征、呼吸衰竭及多器官损伤，造成死亡。

;试验室检验;4病毒分离：从患者呼吸道标本中（咽拭子、口腔含漱液、鼻咽或气管吸出物、痰或肺组织）分离甲型H1N1流感病毒。惯用方法有鸡胚接种法和细胞培养法。现有诊疗方法中，病毒分离法是较敏感，但需要2-3周时间。;人感染猪