基因的重组与转移.pptVIP

酵母0.1mol/LLiCl处理插入外源基因的酵母载体感受态40%PEG4000（2）利用Li+盐进行转化第31页,共40页，2024年2月25日，星期天叶盘消毒切取土壤农杆菌浸泡看护培养基愈伤组织分化幼苗二、导入植物细胞1.叶盘法（leafdisk）第32页,共40页，2024年2月25日，星期天植物细胞原生质体纤维素酶和果胶酶DNA混合入电击缓冲液1-2kV,3-25?F电击愈伤组织幼苗分化2.电击法（electroporation)第33页,共40页，2024年2月25日，星期天又称高速微型子弹射击法（High-velocitymicroprojectiles)DNA1.2?m钨弹头吸附特制手枪射击植物装入3.基因枪法（genegun）4.农杆菌（agrobacterium）介导第34页,共40页，2024年2月25日，星期天（1）原理：三、导入哺乳动物细胞1.磷酸钙沉淀法HEPES缓冲盐水与含有氯化钙和DNA的溶液缓慢混合，会形成含磷酸钙和DNA的沉淀。依据不同的细胞类型，平皿上最多能有10%的细胞能吸收DNA沉淀。第35页,共40页，2024年2月25日，星期天不需要载体。（2）特点：第36页,共40页，2024年2月25日，星期天脂质体有商业试剂盒（如L