09项目九 01细胞工程与育种.ppt

生物技术在植物育种中的作用Theroleofbiotechnologyinplantbreeding项目九主讲教师：刘学勤办公室：研发楼A217QQ：764779742

细胞工程与育种01基因工程与育种02目录CONTENTS分子标记辅助选择03

任务一细胞工程与育种PART0101

任务一细胞工程与育种植物细胞工程是指以植物组织和细胞培养技术为基础发展起来的一门科学。它以植物细胞为基本单位，按照人们的意愿，在离体条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。包括植物细胞核组织培养、花药培养、体细胞变异筛选、幼胚培养、试管受精和原生质体融合等。理论基础是植物细胞的全能性，是指细胞所具有的形成各种细胞类型的潜在能力。因为细胞核内有保持物种遗传性所需要的全套遗传物质，所以高度分化的体细胞具有发育成一个生物体的能力。

任务一细胞工程与育种一、植物细胞和组织培养在育种中的应用植物组织培养是20世纪发展起来的一门新技术，以植物细胞全能性为理论依据。在离体、无菌环境下，植物进行无性繁殖的技术。已经成为大规模、批量工厂化生产种苗的新方法，并在生产上越来越得到广泛的应用。植物组织培养的概念是指在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工控制的环境里，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

任务一细胞工程与育种植物组织培养按外植体或培养对象的来源不同可分为以下几种：植物组织或愈伤组织培养，这是狭义的组织培养，是对植物体的各部分组织进行培养，如茎尖分生组织、胚乳组织和薄壁组织等进行离体培养。器官培养，即离体器官的培养，根据作物和需要的不同，包括根尖、叶片、子叶、花瓣、雄蕊、雌蕊、等外植体的培养。胚胎培养，指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体培养。胚胎培养所用的外植体有：幼胚、胚乳和子房等。细胞培养，是对单个细胞，如花粉单细胞或很小的细胞团的离体培养的方法。原生质体培养，是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。

任务一细胞工程与育种组织培养的流程可以分为以下几个步骤：第一步，将植物材料洗干净，选取适宜的组织作为外植体。外植体是指在植物组织培养过程中，从植物体上被分离下来的，接种在培养基上，供培养用的原生质体、细胞、组织、器官等成为外植体。第二步对外植体进行消毒。在超净工作台中对外植体进行灭菌，常用的试剂有医用酒精、次氯酸钠、灭菌灵等。第三步接种。将消毒好的外植体接种在培养基中，暗培养，形成愈伤组织。愈伤组织是指植物受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处不断增殖产生的一团不定形的薄壁组织。

任务一细胞工程与育种第四步培养。初代培养是在获得无菌材料和无性繁殖系。即接种某些外植体后，最初的几代培养。继代培养在初代培养的基础上所获得的芽、苗、胚状体和原球茎等，继代培养中扩繁的方法包括：切割茎段、分离芽丛、分离胚状体等。经几代培养后愈伤组织发育成幼苗第五步驯化移栽。试管苗移栽是组织培养过程的重要过程，必须通过炼苗，例如通过控水、减肥、增光、降温等措施，使幼苗逐渐地适应外界环境，从而使生理、形态、组织上发生相应的变化，使之更适合于外界环境。

任务一细胞工程与育种（一）体细胞克隆变异及其育种利用体细胞克隆变异指植物组织和细胞培养物在培养过程中产生的变异。Larkin提出了“体细胞克隆变异”，Evans将来自配子体组织的变异称为“配子体克隆变异”，以此区分来源于体细胞和单倍体细胞的变异。对于遗传变异的分析而言，Orton为了统一术语，引进了R、R1、R2等，分别表示再生当代、自交第一代、第二代等，至今这一概念还在广泛应用。1.体细胞克隆变异的遗传基础（1）染色体数目变异。（2）染色体结构变异。（3）点突变。

任务一细胞工程与育种2.突变体的筛选（1）选择材料的要求。目前用于分离突变体的细胞材料有：愈伤组织培养物、细胞培养物、原生质体培养物等。（2）诱变处理。为了增加变异，可以对培养材料进行诱变处理，常用的诱变方法有两种：一是物理诱变（X射线和紫外线等)，二是化学诱变。（3）突变体选择。在突变体筛选中常采用两种选择法，即一步筛选法和多步筛选法。（4）突变体鉴定。诱变的细胞从选择培养基上转到非选择培养基上后快速生长，然后接种到分化培养基上继续培养。可以在再生植株上检查突变体的表达，也可以在后代的组织培养物上检测。

任务一细胞工程与育种3.在作物改良上的应用?（1）抗病。（2）抗除草剂。（3）抗氨基酸或氨基酸类似物。（4）耐盐。（5）耐旱。

任务一细胞工程与育种（二）单倍体细胞培养及其育种利用单倍体是体细胞染色体组数等于本物种配子染色体组数的个体或细胞。单倍体细胞培养包括三个方面：花药