PCR技术在食品微生物中的检测.pptxVIP

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报告人:冯姣

PCR技术简介PCR技术在食品微生物检测中的应用PCR技术在食品微生物检测中的优势PCR技术在食品微生物检测中的存在问题目录

荧光定量PCR常规PCR检测多重PCR检测荧光定量PCR检测IMS-PCR检测PCR-DGGE在热稳定DNA聚合酶的催化下,常规PCR检测原理是在存在DNA模板、dNTP、引物、适当缓冲液与MgCl溶溶液的反应混合物中,对一对寡核苷酸引物所界定的DNA片段进行扩增。多重PCR(multiplexPCR)的检测原理与传统PCR相同,如果存在与各引物对特异性互补的模板,只不过是在同一反应体系中加入1对以上的特异性引物,那么就可以同时在同一个反应管中扩增出1条以上的目的DNA片段。使用这一方法可以同时检测1个以上目的基因或者借助其交叉限制进行确认。与常规的PCR相比,还具有扩增效率高、产物特异性高和经济简便等特点,特别适合食品中多种致病菌的快速检测.

PCR操作过程

准确性用传统的方法检测食品中微生物要分离出所有的微生物很困难,那是因为,食品中污染微生物种类相当多,即使是同一种食品中微生物种类也相当多。快捷性一般的腐败菌检测至少需要2~5d,甚至7d以上,由此可见,传统的检测方法最大的缺点就是检测需要时间太长了。检验结果出来时通常产品已经流向市场,对实际生产具有严重的滞后性。而PCR技术检测食品微生物可以在1d之内检测出结果,甚至在几个小时就可以得出检测结果,对食品工业生产具有相当好的指导作用。

1.食品成分复杂,如果不能有效的排除各因素的干扰,可能会出现假阴性。2.PCR反应灵敏度高,操作时要求严格,稍不注意有外界DNA介入就会造成假阴性3.需要建立一套快速有效的提取DNA的方法

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