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ETS1基因沉默逆转MCF-7ADR多药耐药的实验研究的开题报告
一、研究背景与意义
多药耐药是肿瘤治疗中常见的问题,也是肿瘤患者治疗失败的主要原因之一。研究表明,多药耐药与肿瘤细胞中特定基因的表达失调等因素有关。ETS1基因作为一种转录因子,在多种肿瘤中表达异常,并且与肿瘤细胞的增殖、转移和耐药性等方面密切相关。因此,探究ETS1基因在多药耐药中的作用机制,对于寻找肿瘤治疗新靶点,提高治疗效果具有重要的意义。
二、研究内容
本研究将采用质粒介导的siRNA技术沉默MCF-7ADR细胞中的ETS1基因,观察ETS1基因沉默对MCF-7ADR细胞耐药性以及细胞增殖、转移能力的影响,并研究ETS1基因沉默对多种耐药基因的表达变化及其调控机制。
三、研究方法
1、建立沉默ETS1基因的MCF-7ADR细胞株:通过质粒介导的siRNA技术,构建含有ETS1基因特异性siRNA的质粒,并将其转染到MCF-7ADR细胞中,筛选出效果最佳的siRNA序列,建立沉默ETS1基因的细胞株。
2、细胞增殖和转移能力的检测:采用CCK-8法和Matrigel侵袭实验,测定沉默ETS1基因的MCF-7ADR细胞的增殖和转移能力。
3、耐药基因的表达变化:利用qRT-PCR技术,检测沉默ETS1基因的MCF-7ADR细胞中多种耐药基因的表达变化。
四、预期结果
我们预计,ETS1基因沉默可逆转MCF-7ADR细胞的多药耐药性,并抑制细胞增殖和转移能力。同时,ETS1基因沉默可能通过影响多种耐药基因的表达,参与细胞的多药耐药性形成与发展。
五、研究意义
本研究有望为肿瘤治疗的新靶点的寻找提供重要线索,为寻找治疗耐药性的新策略提供理论依据,进一步拓展肿瘤治疗的可能性。
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