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TGEV双抗体夹心ELISA方法建立与胶体金免疫层析试纸条的制备的开题报告

一、研究背景

猪传染性胃肠炎是由猪冠状病毒引起的一种具有高度传染性的肠道传染病，严重影响了猪养殖业的发展。目前，针对猪冠状病毒的检测方法主要包括PCR方法和免疫学方法。其中，ELISA和免疫层析试纸条因其高效、快速、敏感、特异等优点，在猪冠状病毒检测中得到了广泛应用。

二、研究内容

1、建立TGEV双抗体夹心ELISA方法

本研究将采用多价抗体对TGEV进行检测。首先，利用兔抗TGEV多克隆抗体制备TGEV多价抗体；然后，用这种多价抗体和鼠抗TGEV单克隆抗体进行ELISA夹心测试。最终，建立高效、快速、敏感、特异的TGEV双抗体夹心ELISA检测方法。

2、制备胶体金免疫层析试纸条

基于TGEV多价抗体和鼠抗TGEV单克隆抗体，本研究将制备一种高效、快速、敏感、特异的胶体金免疫层析试纸条。试纸条分为两个部分：上部为抗TGEV单克隆抗体标记的胶体金染料线，下部为TGEV多价抗体的吸附纸片。样品经过加样后，TGEV与上部抗TGEV单克隆抗体结合，形成红色线或点；同样，下部TGEV多价抗体与TGEV结合，形成第二个红色线或点。若两个红色线/点均出现，则表示检测阳性结果。

三、研究意义

本研究的TGEV双抗体夹心ELISA方法和胶体金免疫层析试纸条制备方法，不仅可以有效地检测TGEV，同时具备了快速、高效、敏感、特异等优点，在猪冠状病毒的检测中具有较高的应用价值。

四、研究进度

目前，已完成兔抗TGEV多克隆抗体制备和鼠抗TGEV单克隆抗体制备的工作，并开始进行TGEV双抗体夹心ELISA方法的建立和胶体金免疫层析试纸条的制备。计划在3个月内完成TGEV双抗体夹心ELISA方法和胶体金免疫层析试纸条的优化和完善，并进行相应的检测验证工作。