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精液品质常规检查和活力检查;精液品质检查的目的:确定精液品质的优劣作为精液稀释、保存的依据。
包括:精液的外观检查和实验室检查。
外观检查:采精量、颜色、气味、云雾状和pH值。
实验室检查:活力、密度、精子形态等。
;整个检查过程要迅速、准确,一般在5~10分钟内完成,以免时间过长影响精子的活力。
确定是否可用于输精以及对精液稀释比例的确定。操作室要清洁无尘,室温应保持在18~25度。
;5.pH值;;正常精液的颜色为乳白色、灰白色或淡黄色。
如果精液颜色有异常,则说明精液不纯或生殖道病变,凡发现颜色有异常的精液,均应弃去不用。;
;
;正常的精液具有微腥味,无腐败恶臭气味。有特殊臭味的精液一般混有尿液、脓汁、粪渣或其他异物,一旦发现,不应留用。;精液的液面呈上下翻滚状态,像云雾一样,称为云雾状。
云雾状越明显,说明精液密度越大,活率越高。正常未稀释的牛、羊精液肉眼可观察到云雾状。;猪、马精液略碱性约7.2~7.4,牛、羊偏酸性6.5~6.8。;精子活力又称活率,是指精液中做直线前进运动的精子占整个精子数的百分比。鲜精活率通常在70~80%,冻精活率不低于35%。;1.检查方法;准备工作
1、器械的准备光电显微镜;清洗干净的载玻片和盖玻片,并放入37℃左右的恒温箱内备用;玻璃棒;镊子;烧杯;细管剪刀;擦镜纸;全自动精子分析仪。
2、试剂的准备生理盐水、38~40℃的温水。
3、精液的准备新鲜的精液、牛的细管冻精;(1)新鲜精液检查
用玻璃棒醮取1滴原精液或经生理盐水稀释的精液,滴在载玻片上,呈45°盖好盖玻片,载玻片与盖玻片之间应充满精液,避免气泡存在,显微镜下观察,估测呈直线运动的精子数占总精子数的百分率。;(2)细管冻精检查
在烧杯中盛满38~40℃温水,打开液氮罐,把镊子放在罐口预冷,然后提起提筒至罐的颈部,迅速夹取一支细管冻精放入烧杯中,轻轻摇晃使其基本融化(10s左右),取出细管冻精并擦干,用细管剪刀剪开,采用平板压片法检查活率。;平板压片法精子活力检查的步骤;取一小滴精液滴于盖玻片上,迅速翻转盖玻片使精液形成悬???,置于凹玻片的凹窝上形成悬滴片,置于显微镜下放大400倍观察。此法精液较厚,检查结果可能偏高。;结果评定
评定精子活力多采用“十级一分制”。
如果精液中有80%的精子做直线运动,精子活力计为0.8;如有50%的精子做直线运动,活力计为0.5,以此类推。
评定精子活力的准确度与经验有关,具有主观性,检查时要多看几个视野,取平均值。;(1)牛、羊和鸡的精子密度较大,可用生理盐水稀释后再检查。
(2)要求检查温度在37~38℃,如果没有保温装置的,检查速度要快,在10s内完成。;精子活力检查;精子密度检查;定义:指每毫升精液中含有的精子数。
根据精子密度、精子活率和每份输精量中应含有效精子数,可确定精液稀释倍数和可配母畜的头数。
品质良好的精液精子密度大,而品质差的精液精子密度小。;1.检查方法;目测法;图片来源于网络;1mL原精液中的有效精子数
=5个中方格的精子数×5(25个中方格)×10(等于1mm3内的精子数)×1000(1mL稀释后的精子数)×稀释倍数(牛、羊为100或200倍,猪/马为10或20倍);精子密度仪测定;精子的形态检查;形态检查分为精子畸形率和顶体异常率。
畸形精子:形态和结构不正常的精子。
精子畸形率:是指畸形精子占视野中总精子数的百分率。
正常精液中一般不会超过10~20%,否则不宜用作输精。;图片均来源于网络;发生精子畸形的主要原因有:
精子的生成过程受到破坏;
副性腺及尿道分泌物的病理变化;
由精液射出起至检查过程中,没有遵守技术操作规程,精子遭到外界的不良影响。;发生精子畸形的主要原因有:
具体说来,造成卷尾、双尾等尾部异常的精子是由于遗传因素所致,对这类的精子应淘汰,尾部曲折是由于精子受到温度、酸碱度突然改变的打击所致;无尾精子是由于机械应激或渗透压的突然改变,出现这类问题应对整个采精及其操作过程进行分析,遗传、年龄、季节性变化等。;精子畸形率检查;
(4)染色:用红墨水或蓝墨水染3-5分钟,用蒸馏水轻轻冲洗,干后镜检。
(5)镜检:通常观察2-3个(抹片的左、中、右)视野,计数其中200-500个精子及其中的畸形精子数。两抹片畸形率的差值不超过6%。
;
(6)求畸形率。
畸形率=畸形精子数/视野中总精子数×100%。
一般品质优秀的精液精子畸形率不超过17.2%。如果畸形率超过20%,则视为精液品质不良,不能用做输精。
;精子顶体异常率检查
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