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10.1DNA生物合成;;DNA是生物遗传主要物质。生物机体遗传信息以密码形式编码再DNA分子上,表现为特定核苷酸排列次序。并经过DNA复制由亲代传递给子代。在后代生长发育过程中,遗传信息自DNA转录给RNA,然后翻译成特异蛋白质(中心法则)。以执行各种生命功效,使后代表现相同遗传性状。;转录—在DNA分子上合成出与其核苷酸次序相对应RNA过程。;10.1DNA生物合成;DNA复制过程中,首先碱基间氢键断裂并使双链解旋和分开,然后每条链可作为模板在其上合成新互补连,新形成两个DNA分子与原来DNA分子碱基次序完全一样。在此过程中,每个子代分子一条链来自亲代DNA,另一条链子是新合成。这种方式称为半保留复制。;新版核酸和蛋白质的生物合成;DNA复制;(一)半保留复制试验依据;试验结果表明:子一代DNA双链中有一股是15N单链,而另一股是14N单链,前者是从亲代接收和保留下来,后者则是完全新合成。;二、DNA复制起点和方式;DirectionofDNAreplication;复制叉—亲代链分开及新生DNA开始复制处形成Y形结构。;;三、原核生物DNA复制酶学;(一)复制中解链和DNA分子拓扑学改变;(二)引物酶(Primase)和引发体(Primosome);Primosome(consistsofsixproteins)
PriA(dualrole)displaceSSBfromS.SDNAandhelicase
DnaTrequiredatpreprimingstage
DnaBiscentralcomponent,actionwithDnaC
DnaCiscentralcomponent,actionwithDnaB
PriBfunctionisunknown
PriCfunctionisunknown
DnaGprimase;(三)DNA聚合反应和聚合酶
1、DNA聚合反应
Kornberg(1956)发觉了DNA聚合酶。该酶可催化4种脱氧核糖核苷三磷酸合成DNA。脱氧核糖核苷酸被加到DNA链末端,同时释放出无机焦磷酸。;①反应需要接收模板指导
②引物:反应需要有引物3′羟基存在。
③底物:4种脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)
④产物DNA性质与模板相同。
⑤复制在5’-3’方向延伸;2、DNA聚合酶(DNApol);(2)DNA聚合酶Ⅱ(pol-Ⅱ),
DNA聚合酶Ⅱ为多亚基酶。
作用:
A:从5`3`方向合成DNA,并需要带有缺口双链DNA作为模板,缺口不能过大。
B:3`5`核酸外切酶活性,但无5`3`核酸外切酶活性。
不是复制酶,而是修复酶。
每分子??分钟催化2400个dNTP聚合。
每个大肠杆菌细胞约有100个分子DNA聚合酶Ⅱ。;(3)DNA聚合酶Ⅲ(pol-Ⅲ);pol-Ⅲ异二聚体结构;pol-Ⅲ异二聚体结构;β亚基由两个形成夹子结构;(4)DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶Ⅴ
;DNA聚合酶;新版核酸和蛋白质的生物合成;新版核酸和蛋白质的生物合成;(四)DNA连接酶;四、原核生物DNA生物合成过程;包含起始、延伸和终止三个阶段。;半不连续复制:在复制叉上前导链连续合成子代链,而滞后链不连续合成子代链。;(滞后链);DNA生物合成过程;两个复制叉在oriC约180度对面相遇,在这一区域有几个终止子位点,它们与tus基因产物即DnaB解旋酶抑制剂结合,从而阻止复制叉前进。
复制终止后,由DNA聚合酶Ⅰ填补空隙,最终由连接酶封口。;
DNA复制关键点是:
1)在复制开始阶段,DNA双螺旋拆分成两条单链。
;2)以DNA单链为模板,按照碱基互补配正确标准,在DNA聚合酶催化下,合成与模板DNA完全互补新链,并形成一个新DNA分子。;3)经过DNA复制形成新DNA分子,与原来DNA分子完全相同。经过一个复制周期后,子代DNA分子两条链中,一条来自亲代DNA分子,另一条是新合成,所以又称为半保留复制。;五、真核生物DNA复制合成;;端粒复制依赖于端粒酶。
端粒--每一线性DNA末端含有多拷贝富含G六核苷酸重复序列。;●端粒DNA(Telomer);长短;六、DNA损伤及其修复;(一)诱发突变原因
物理
(紫外、高能射线、电离辐射)
化学
(烷基化试剂、亚硝酸盐、碱基类似物)
生物原因
(碱基对置换、碱基插入/缺失造成移码);光聚合反应;当DNA受到大剂量紫外
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