制备柱的选择.ppt

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了解竞争对手

Grace-Spring设计原理-通过弹簧的持续加压来延长色谱柱的寿命举例*OBD也是二次压缩的产物长度250mm直径(mm)4.61021.23050填料装填量(g)2.411.150100.2278α1.3载量(mg)12562505011390α1.3载量(mg)0.241.151028工作流速(mL/min)182143110较高流速(mL/min)2123055180α=分离度制备柱的直径一般由载量决定。通常条件下,制备色谱柱的载量为装填量的0.01%~0.5%之间,如果载量过小,则样品易吸附在柱上难以洗脱;如果载量过高,可能造成部分样品无法吸附而直接流最优状态下载量、流速与直径的关系填料选择原理同分析柱客户没有特别要求的情况下,优先推荐Luna、Gemini等适用性广的填料100%DMSO进样平行放大理论-载量首先需在分析柱上摸索出合适的条件,得到分析柱的载量计算出放大因子SF制备柱的载量=SF×分析柱上的载量如何销售制备柱如何销售制备柱平行放大理论-实例假设从150×4.6mm放大到100×21.2mmSF=(21.2/4.6)2×(100/150)=14.16如果分析柱上样品能载5mg,则估算出在制备柱的载量5×14.16=70.8mg,且可以得到和分析柱一样的分离度分析柱和制备柱的填料一致的情况下估算结果较准确,可以借此机会同时推荐分析和制备柱如何销售制备柱平行放大理论-流速和载量类似,先要摸索出分析柱上的条件计算出流速的放大因子需要考虑到系统耐压的问题平行放大理论-梯度条件梯度放大关键-流动相在单位时间内流过色谱柱的体积根据分析柱上的梯度时间来计算出制备柱上的梯度时间同样需要考虑系统耐压的问题推荐制备时引导性的焦点问题-如何看待分离度合理利用超载→制备色谱的峰不需要和分析色谱一样分的很开,而是尽可能靠近与重叠选择最佳填料→直接决定分离度,进一步决定载量,如果载量够高的话,不重叠的峰可能比其它柱子重叠的峰单次纯化量更大极性与疏水性的选择正确与否很重要,道理同分析柱如何销售制备柱

合理利用超载推荐制备时引导性的焦点问题-如何看待流速制备柱的流速最终由客户的需求决定,高流速意味着更高的效率,但是对柱床的冲击也更大,一定程度上会影响寿命每种规格的制备柱都有一个最佳流速,最佳流速下的压力即同比条件下分析柱的压力优先推荐10μ的填料来增加流速的可调性,也可以体现AXIA在柱效上的优势推荐制备时引导性的焦点问题-如何看待寿命绝大多数制备样品在酸性条件下进行,加TFA走梯度是最常见的。TFA酸性强,有时会造成键合的C18链的水解脱落,所以耐酸的填料会更好,Luna等最低PH为1.5,大多竞争对手产品为2.0甚至于更高对于喜欢加DMSO增溶的客户,建议尽量不加或少加柱头塌陷和污染造成的寿命缩短,需要向客湖解释其本质原因,然后引出AXIA技术优势如何延长制备柱的寿命进样前的处理→过滤、超声等用50:50的DMSO:甲醇代替100%DMSO进样→减少样品在流动相中的析出增加梯度中100%有机溶剂的时间段→减少残留使用制备型保护柱套→一定要让客户了解不用保护柱的后果有多严重,要热情,为客户着急制备柱的延伸产品制备大都从分析筛选方法,有时也从LC-MS快速筛选,这是我们同时推荐LC-MS柱和分析柱的机会保护柱套和柱芯各种填料设计原理-通过优化柱床密度来增加制备柱寿命和重现性了解竞争对手

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