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3D培养促进牙周膜干细胞矿化及抗炎特性的实验研究的开题报告

研究背景：

牙周膜（periodontalligament，PDL）是牙齿根部与牙槽骨之间的重要连接组织，其中含有牙周膜干细胞（periodontalligamentstemcells，PDLSCs），具有多向分化和自我更新的潜能。牙周炎是PDL发炎，导致牙周膜中的各种成分遭受破坏，最终导致牙齿松动脱落的一种慢性疾病。目前，牙周炎已成为全球性公共卫生问题。传统的牙周膜干细胞培养方式多为二维培养，但这种方式在维持细胞生长和功能上存在一定局限性。而采用3D培养模式，能够更加真实地模拟生物体内的细胞环境，提高细胞的生长和分化能力，并增强其抗炎和矿化能力。

研究目的：

本文旨在研究3D培养模式对PDLSCs的影响，探究其矿化和抗炎作用，为牙周炎的治疗提供新的基础研究理论和实践依据。

研究方法：

1.制备3D培养体系：利用培养基与牙周膜细胞外基质（extra-cellularmatrix，ECM）的共同作用，在含有ECM的培养基内制备3D培养体系。分别以二维培养和常规3D培养方法为对照组。

2.分离和鉴定PDLSCs：从人口腔组织中分离PDLSCs，并鉴定其干性和分化潜能。用多色流式细胞仪测定其表面标志物CD90、CD146和CD105的表达情况。

3.比较细胞增殖率：采用CCK8试剂盒测定培养物中不同培养条件下PDLSCs的增殖率。

4.矿化和抗炎作用的研究：采用碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）染色和荧光共聚焦显微镜检测PDLSCs的矿化能力。同时检测细胞中多肽因子IL-6和TNF-α的表达量，用以观察其抗炎作用。

研究意义：

通过研究3D培养模式对PDLSCs的影响，探究其矿化和抗炎作用，对于研究牙周炎的病因及治疗提供理论基础和实践依据，具有重要的研究意义和应用价值。