病毒的血凝抑制试验.pptVIP

目录1.实训目的2.实训原理3.实训材料4.实训步骤5.实训应用1.实训目的掌握四单位病毒液的制备方法掌握微量血凝抑制试验的操作方法掌握血清血凝抑制价的判定方法2.实训原理血凝性病毒与血清中的特异性抗体结合后，失去了凝集红细胞的能力，该现象称为血凝抑制；血凝抑制病毒血凝抑制原理示意图红细胞不凝集（血凝抑制）病毒抗体复合物红细胞病毒特异性抗体2.实训原理红细胞吸附与沉降发生血凝抑制后，红细胞受重力作用沉降于反应板最低点，形成纽扣状圆点，倾斜反应板，则呈流泪状挂线。（反应板底面一点红或一线红）病毒血凝抑制原理示意图血凝性病毒+抗病毒抗体+红细胞反应孔内成分反应孔内作用无病毒凝集红细胞（不血凝）病毒凝集红细胞（血凝）血凝性病毒+红细胞红细胞病毒不凝集红细胞（不血凝）反应孔内结果3.实训材料试剂3.实训材料器材4.实训操作*四单位病毒液的制备加样感作判定结果操作术式待检血清25*孔号12345678待检血清稀释倍数1:21:41:81:161:321:641:128/0.85%灭菌生理盐水2525252525252550252525252525弃四血凝单位病毒抗原252525252525251%鸡红细胞悬液2525252525252525振荡混匀，室温感作40min左右观察结果振荡混匀，室温感作30min左右4.实训操作4.实训操作注意事项（1）1%鸡红细胞悬液的加样与保存（2）微量移液器的使用4.实训操作注意事项（3）待检血清的连续稀释第12孔加50μL生理盐水仅第1孔加待检血清原液连续稀释至第10孔4.实训操作注意事项（4）结果判定空白对照红成一点完全血凝抑制红成一点截取相应实验结果的图片5.实训应用测定待检血清效价：用已知的病毒抗原来判定待检血清（未知）的抗体滴度（如本次实训所示）。新城疫病毒+未知待检血清血凝抑制阳性（说明待检血清中存在新城疫病毒的抗体，血凝抑制价越高，血清抗体滴度越高）血凝抑制阴性（说明待检血清中不存在新城疫病毒的抗体）5.实训应用病毒鉴定：若为未知病毒，则可用已知抗病毒血清来检测该病毒。根据是否出现血凝抑制现象来确定该病毒是否为该血清所对应的抗原病毒。未知待检病毒+新城疫阳性血清血凝抑制阳性（说明未知病毒为新城疫病毒）血凝抑制阴性（说明未知病毒为非新城疫病毒，可以其它病毒（如禽流感病毒）的阳性血清进行血凝抑制试验，确定究竟为何种病毒）THANKS**************