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PKH26标记单核细胞衍生的肝样细胞裸鼠体内示踪的实验研究的开题报告
背景介绍:
肝细胞裸鼠是指通过肝细胞移植到裸鼠肝内形成功能性胆汁与胆汁酸的动物模型。该模型在肝细胞代谢、药物代谢、肝病治疗等方面的研究中有广泛应用。而单核细胞衍生的肝样细胞则是一种来源于小鼠骨髓单核细胞的肝细胞前体细胞,能够分化为成熟的肝样细胞。因此,在肝细胞裸鼠模型的研究中,单核细胞衍生的肝样细胞也成为了一个备受关注的研究对象。
在肝细胞裸鼠模型中,追踪移植细胞的位置和数量是非常重要的。然而,目前市面上的追踪荧光染料或荧光蛋白存在不能长时间存活或不稳定的缺点。而PKH26荧光染料则是一种可稳定长时间存活的染料,可被单核细胞衍生的肝样细胞吞噬并标记其位置和数量。
因此,本研究计划使用PKH26标记单核细胞衍生的肝样细胞,并将其移植至肝细胞裸鼠内,观察PKH26标记细胞在裸鼠内的分布及存活情况,旨在为单核细胞衍生的肝样细胞在肝病治疗中的应用提供基础数据支持。
研究方法:
1.实验动物:选用8周龄裸鼠10只,分为实验组和对照组。
2.实验组操作:制备单核细胞衍生的肝样细胞,通过PKH26标记后移植入实验组裸鼠体内。
3.对照组操作:对照组裸鼠内移植未标记的单核细胞衍生的肝样细胞。
4.捕获图像:在移植后1、3、7、14、21天采用荧光显微镜、光学显微镜、活体成像仪等手段观察PKH26荧光标记的单核细胞衍生的肝样细胞在裸鼠内的分布及活力情况。
5.数据分析:对实验结果进行统计学分析,包括PKH26标记的单核细胞衍生的肝样细胞的存活率、分布情况、数量比较等。
预期结果:
本实验预期能够观察到PKH26荧光标记的单核细胞衍生的肝样细胞在裸鼠体内的迁移、分化以及存活情况。同时,本实验结果也有望为单核细胞衍生的肝样细胞在肝病治疗中的应用提供基础数据支持,为肝病治疗的临床应用提供技术支持。
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