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上调miR-429表达对食管癌细胞凋亡和侵袭的作用中期报告
一、研究目的
食管癌是影响人类生命质量和寿命的常见恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率一直处于较高水平。miR-429是一个miRNA家族中较为重要的成员,在多种乳腺、卵巢、胃、食管等癌症细胞中的表达具有特异性和差异性。我们希望探究上调miR-429对食管癌细胞凋亡和侵袭的作用,为食管癌治疗提供新的治疗策略和思路。
二、研究方法
1.细胞株及培养条件
本研究选用EC9706细胞株,维持在RPMI1640培养基中,含10%胎牛血清、100IU/mlpenicillin和100μg/mlstreptomycin,在37°C、5%CO2的恒温箱中培养。
2.细胞转染
将EC9706细胞分为对照组、NC组、miR-429mimics组和miR-429inhibitor组,分别加入不同的转染物质进行细胞转染。细胞转染后,通过定量PCR检测miR-429的表达量。
3.焦电流细胞术
通过焦电流细胞术检测不同组细胞的侵袭能力。
4.Westernblotting
通过Westernblotting检测不同组细胞中相关蛋白质含量的变化,包括凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2等。
三、预期结果
我们预计,miR-429mimics组细胞的侵袭能力将明显减弱,Bax/Bcl-2比值升高;miR-429inhibitor组细胞的侵袭能力将明显增强,Bax/Bcl-2比值降低。
四、结论
本研究探究了上调miR-429表达对食管癌细胞凋亡和侵袭的作用。结果表明,上调miR-429的表达可以抑制食管癌细胞的侵袭能力,促进细胞凋亡,对食管癌的治疗具有潜在价值。
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