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原核生物的转录起始
-RNA聚合酶之核心酶
罗杰
华中农业大学
αfactor；
•CoreE的组建α+α→2α+β→+β’
•αCTD保证RNApol.结合于Upelement
模板链CAP-cAMP位点，进行正调控
CAP-cAMP
Upelement
βfactor；
★促进RNApol.+NTP→RNAelongation
★完成NMP之间的磷酸酯键的连接
★Editing
★与Rho(ρ)因子竞争RNA3’-end，完成合成终止
★构成Holoenzyme后，β因子含有两个位点
Isite(RifS);识别位点，专一性地结合ATPorGTP
要求高浓度的ATPorGTP！！
Esite(RifR);延伸位点，对NTP非专一性结合
β’factor；
★强碱性亚基
★保证RNApol与Non-template
（sensestrand）的结合
★受K酶抑制
全酶Holoenzyme含有五个功能位点
★sensestrandDNAbindingpoint(β’)
★DNA/RNAhybridsite(β)
★D.S.DNAunwindingpoint(α)
★D.S.DNArewindingpoint(α)
★σfactorpoint
EnzymeMovement
DNAcodingstrand(β’)
Rewindingpoint(α)Unwindingpoint(α)
Isite(RifS);专一性地结合ATPorGTP
Esite(RifR);10-17bp
非专一性结合NTP
解链区
IEDNAtemplatestrand
RNAbindingsite(β)RNA/DNAhybrid(β)
利福平(Rifampin)抗性位点
的鉴定
在尿素电泳缓冲液中纯化
E.coliRNApol.的单个亚基
(AlfredheilZiling1970)
分离与重建RNApol.
重建RNApol.
RifS
RifR
Theβsubunitisobviously
RSR
RifdeterminantofRiforRif
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