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本发明的目的是提供一种将外源核酸片段导入双壳贝类精子中的方法,所述的方法将收集的双壳贝类的精子离心去除上清后,加入NaCl溶液混匀,再离心后去除上清;将去除上清的沉淀加入CaCl2溶液后吹打混匀;再加入外源核酸片段后进行冰水浴;冰浴结束后的溶液立即在42℃水浴条件下热激;转化完成后的溶液随后再次冰水浴,完成外源片段导入精子的操作。实验证明,采用本发明的方法导入sgRNA重组表达质粒,受精成功后泥蚶胚胎体内导入率可达47%~70%。与现有技术相比,本发明的导入方法操作简单,导入成本低,操作时间短,
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN118064501A
(43)申请公布日2024.05.24
(21)申请号202410192006.7
(22)申请日2024.02.21
(71)申请人浙江大学
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