蛋白相互作用Pull-Down实验.docx

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蛋白相互作用Pull-Down试验

试验原理:Pull-Down技术是通过蛋白相互作用来争论细胞通路有力工具。是确定两种或更多蛋白之间相互作用体外方法。Pull-Down试验可用来检测蛋白相互作用条件,并且可用来筛选未知蛋白相互作用。

用作诱饵蛋白是重组蛋白,会含有一个用于纯化亲和标签。这个融合标签就是用于Pull-Down试验根底。最常见标签为谷胱甘肽S-转移酶〔GST〕和多组氨

酸〔6×His〕。其分别使用固相化谷胱甘肽和固相化金属螯合物亲和配体〔如Ni2+

和Co2+〕。

试验预备:

试验仪器:谷胱甘肽琼脂糖凝胶〔镍离子琼脂糖凝胶〕、离心机、试验材料

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