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蛋白质纯化与结晶的原理
获得蛋白质的晶体构造的第一个瓶颈,就是制备大量纯化的蛋白质(10mg),其浓度通常在10mg/ml以上,并以此为根底进展结晶条件的筛选。运用重组基因的技术,将特定基因以选殖(clone)的方式嵌入表现载体(expressionvector)内,此一载体通常具有易于调控的特性。之后再将带有特定基因的载体送入可快速生长的菌体中,如大肠杆菌(Escherichiacoli),在菌体快速生长的同时,也大量生产表现载体上的基因所解译出之蛋白质。一般而言纯度越高的蛋白质比较有时机形成晶体,因此纯化蛋白质的步骤就成为一个重要的打算因素。
在取得高纯度的蛋白质溶液后,接
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