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菠萝皮渣羧甲基纤维素海藻酸钠复合水凝胶珠固定化菠萝蛋白酶的制备及稳定性研究汇报人:2024-01-14
引言材料与方法菠萝皮渣羧甲基纤维素海藻酸钠复合水凝胶珠的制备固定化菠萝蛋白酶的制备contents目录
复合水凝胶珠固定化菠萝蛋白酶的稳定性研究结果与讨论结论与展望contents目录
01引言
固定化技术的优势固定化技术可以提高酶的稳定性和重复使用性,降低成本,拓展应用领域。复合水凝胶珠作为载体的优点复合水凝胶珠具有良好的生物相容性、机械强度和稳定性,可作为固定化菠萝蛋白酶的理想载体。菠萝蛋白酶的应用菠萝蛋白酶是一种广泛应用于食品、医药等领域的酶制剂,具有多种生物活性,如消炎、抗肿瘤等。研究背景和意义
国内外研究现状目前,国内外学者已经对菠萝蛋白酶的固定化进行了广泛研究,但主要集中在单一载体或简单复合载体的应用上,对于复合水凝胶珠作为载体的研究相对较少。发展趋势随着生物技术的不断发展,对于固定化技术的研究也在不断深入。未来,复合水凝胶珠作为固定化菠萝蛋白酶的载体将具有广阔的应用前景。国内外研究现状及发展趋势
本研究旨在制备一种以菠萝皮渣羧甲基纤维素海藻酸钠为基质的复合水凝胶珠,用于固定化菠萝蛋白酶,并研究其稳定性和重复使用性。研究目的首先,通过化学交联法制备菠萝皮渣羧甲基纤维素海藻酸钠复合水凝胶珠;其次,将菠萝蛋白酶固定在复合水凝胶珠上,并研究固定化条件对固定化效果的影响;最后,对固定化菠萝蛋白酶的稳定性、重复使用性等进行研究。研究内容研究目的和内容
02材料与方法
羧甲基纤维素食品级羧甲基纤维素,用于制备复合水凝胶珠。菠萝皮渣新鲜菠萝皮渣,经过清洗、干燥、粉碎处理。海藻酸钠食品级海藻酸钠,用于制备复合水凝胶珠。其他试剂氯化钙、磷酸盐缓冲液等,用于实验过程中的反应和测定。菠萝蛋白酶从菠萝果实中提取的菠萝蛋白酶,用于固定化实验。材料
方法菠萝皮渣处理将新鲜菠萝皮渣清洗、干燥、粉碎,得到一定粒度的菠萝皮渣粉末。复合水凝胶珠的制备将羧甲基纤维素和海藻酸钠按一定比例混合,加入适量的去离子水,搅拌均匀后滴入氯化钙溶液中,形成复合水凝胶珠。菠萝蛋白酶的固定化将菠萝蛋白酶溶液与复合水凝胶珠混合,使酶被吸附和固定在凝胶珠上,然后通过洗涤去除未固定的酶。稳定性测定将固定化菠萝蛋白酶的复合水凝胶珠置于不同温度、pH值和离子强度条件下,测定其酶活性保持率,以评估其稳定性。
实验组与对照组设置01设置实验组为固定化菠萝蛋白酶的复合水凝胶珠,对照组为游离菠萝蛋白酶溶液。不同条件下的稳定性测定02分别在不同温度(如4℃、25℃、50℃)、不同pH值(如pH3.0、pH5.0、pH7.0)和不同离子强度(如0.1M、0.5M、1.0MNaCl)条件下测定实验组和对照组的酶活性保持率。数据处理与分析03记录并整理实验数据,采用适当的统计方法进行数据处理和分析,比较实验组和对照组在不同条件下的稳定性差异。实验设计
03菠萝皮渣羧甲基纤维素海藻酸钠复合水凝胶珠的制备
菠萝皮渣处理将新鲜菠萝皮渣清洗干净,去除杂质,然后进行干燥处理,得到干燥的菠萝皮渣粉末。羧甲基纤维素和海藻酸钠准备选择适当粘度和分子量的羧甲基纤维素和海藻酸钠,分别溶解在去离子水中,制备成一定浓度的溶液。原料预处理
将菠萝皮渣粉末按一定比例添加到羧甲基纤维素和海藻酸钠的混合溶液中,充分搅拌均匀,得到混合溶液。混合溶液制备将混合溶液通过滴管或注射器缓慢滴入到凝固浴中(如CaCl2溶液),在表面张力的作用下形成球形液滴,经过一段时间的交联反应,得到复合水凝胶珠。滴加法制备水凝胶珠将得到的复合水凝胶珠在凝固浴中继续浸泡一段时间,使其充分固化。然后用去离子水反复洗涤,去除残留的凝固剂和未反应的物质。水凝胶珠的固化与洗涤复合水凝胶珠的制备工艺
原料比例菠萝皮渣粉末、羧甲基纤维素和海藻酸钠的比例会影响复合水凝胶珠的性能。需要通过实验确定最佳比例,以获得具有优良性能的水凝胶珠。溶液浓度和粘度羧甲基纤维素和海藻酸钠溶液的浓度和粘度会影响混合溶液的流动性和成珠效果。需要控制溶液的浓度和粘度在适当范围内,以保证水凝胶珠的成型和质量。滴加速度和凝固浴条件滴加速度过快可能导致液滴过大或形状不规则,而滴加速度过慢则可能影响生产效率。凝固浴的温度、浓度和pH值等因素也会影响水凝胶珠的成型和固化效果。因此,需要控制滴加速度和凝固浴条件在最佳范围内。制备过程中关键因素的控制
04固定化菠萝蛋白酶的制备
菠萝蛋白酶的来源及性质来源菠萝蛋白酶是从菠萝果实和茎部提取的一种巯基蛋白酶,具有广泛的底物特异性和较高的催化活性。性质菠萝蛋白酶是一种酸性蛋白酶,其最适pH值在5.5-7.5之间,最适温度在50-60℃之间。此外,菠萝蛋白酶还具有较好的稳定性和耐氧化性。
方法采用海藻酸钠和羧甲基纤维素作为固定化载体,通过交联法制备复合水
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