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《海洋生物综合实验》教学大纲

课程编号课程名称

（英文名称）

海洋生物综合实验

总学时

2周

学分

2

理论学时

0

实验学时

2周

开课单位

海洋与生物工程学院

适用专业

海洋科学

先修课程

生物化学、生物化学实验、微生物学、微生物学实验

实验课程简介

海洋生物综合实验面向海洋技术专业和海洋科学专业学生，在第三学年上学期开设，在以开设生物化学、分子生物学、微生物学理论课程及实验课程的基础上，开设了DNA提取、质粒提取等实验项目，为培养学生的基础操作能力、提高学生的实际动手能力奠定了良好的基础。同时，各个实验相互衔接，增加了学生的设计性和主动性。

实验的内容及要求

实验一：海水鱼类组织DNA的提取

要求：了解鱼类组织DNA组成，掌握DNA提取的原理和操作过程；

内容：（1）鱼类组织的选取；（2）DNA提取

实验二：PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳

要求：掌握PCR的实验技术、琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作及DNA酶切原理及操作；

内容：（1）PCR体系的配制；（2）PCR扩增（3）琼脂糖凝胶电泳；（4）紫外分光光度计法测定DNA浓度

实验三：PCR产物的双酶切及回收

要求：了解PCR产物的双酶切步骤，掌握PCR产物回收的原理和操作过程；

内容：（1）PCR产物的双酶切；（2）胶回收

实验四：重组克隆质粒的构建及抽提

要求：了解重组克隆质粒的构建及抽提的原理和操作过程；

内容：（1）重组克隆质粒的构建；（2）采用质粒小提试剂盒提取质粒

实验五：热激法转化大肠杆菌感受态细胞

要求：了解氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法，掌握热激法转化大肠杆菌感受态细胞的原理及操作；

内容：（1）大肠杆菌的扩增（2）感受态细胞的制备（3）外源基因的转化；（4）转化宿主细胞的培养及结果观察

实验六：重组表达菌株的诱导表达

要求：了解重组表达菌株的诱导表达的原理及操作；

内容：（1）重组表达菌株的大量培养（2）IPTG诱导（3）重组表达菌株的回收；

实验七：重组蛋白的SDS电泳分析

要求：学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作，熟悉垂直板型电泳槽的使用、掌握SDS电泳操作方法

内容：（1）丙烯酰胺凝胶的制备；（2）蛋白质样品处理；（3）SDS电泳；（4）SDS结果观察

毕业生应具有的知识、能力、素质

1、掌握一定的数学、自然科学和人文社会科学知识，具有较扎实的海洋生物技术的专业理论知识。

2、能够将数学、自然科学、人文社会科学知识和专业知识应用于研究或分析生产中遇到的问题，并得出合理有效的结论或提出可行的解决方案。

3、熟悉本专业各类常用分析仪器设备的工作原理和操作使用方法，并能熟练应用于海洋生物病害诊断及水质与饲料的分析化验或与生产需要相关的应用研究。

4、具有海洋生物苗种繁育、遗传育种、健康养殖和病害诊断防治的基本理论、基本知识和基本技能，能研究设计高效环保、健康安全的养殖新模式。

5、具有海洋生物营养需求研究的基本理论知识和基本研究方法与技能，能从事高效环保饲料的研发与生产。

6、掌握管理知识的基本原理和基本方法，具有一定的管理能力，并能在多学科环境中应用。

7、掌握科学的世界观和方法论，具有正确的价值观和道德观，具有高度的社会责任感，爱岗敬业、诚信守法。

8、具有良好的团队协作精神及在团队中发挥积极作用的能力。

9、具有较强的沟通交流能力，并具备一定的国际视野，能够在跨文化背景下与同行进行沟通交流。

10、具有自主学习和终身学习的意识及能力，能运用现代信息技术查阅中外文献进行自主学习。

实验培养学生的知识、能力、素质

1、对毕业生知识的支撑：生物技术综合实验是在生物化学、微生物学等课程的基础上开设，使学生加深对基础理论知识的理解。

2、对毕业生能力的支撑：掌握生物技术相关实验操作技能，提高学生的实际动手能力。

3、对毕业生综合素质的支撑：了解生物技术在海洋技术、海洋科学方面的应用，以基因工程实验为主线，培养具有良好的科学与工程素质的应用型人才。

实验进度安排

1、海水鱼类组织DNA的提取：4学时；

2、PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳：4学时；

3、PCR产物的双酶切及回收：6学时；

4、重组克隆质粒的构建及抽提：4学时；

5、热激法转化大肠杆菌感受态细胞：6学时；

6、重组表达菌株的诱导表达：6学时

7、重组蛋白的SDS电泳分析：4学时。

主要仪器设备

离心机、细菌培养箱、分析天平、匀浆器、SDS电泳仪、水平电泳槽、恒温水浴锅、恒温摇床、制冰机、紫外分光光度计

实验教材、指导书及其他学习资源

实验指导书：《生物技术综合实验指导书》（自编）、

参考书目：

《海洋生物技术原理和应用》，张士璀等主编.北京海洋出版社,1997.

《生物技术》，刘大钧主编.江苏科学技术出版社，2004.

《生物化学实验技术》，周顺伍主编.北京农业