高职工业微生物学.ppt

脱壳：进入细胞内的病毒脱去衣壳，释放出病毒的基因组。生物合成：早期，病毒基因组在细胞内转译、转录合成非结构蛋白（即早期蛋白，包括必需的复制酶和抑制宿主细胞核酸与蛋白质合成的酶）；之后，根据病毒基因组的指令，复制病毒的核酸，合成结构蛋白与一系列非结构蛋白。病毒的基因组有不同类型，其生物合成的过程亦有所不同。此阶段细胞内找不到病毒颗粒。第64页,共76页，星期六，2024年，5月装配与释放：子代核酸和蛋白质可在胞核、胞质、核膜及胞膜上进行装配。装配完成的病毒以裂解、出芽等方式释放。包膜的脂质即在释放时获得。第65页,共76页，星期六，2024年，5月第66页,共76页，星期六，2024年，5月病毒的遗传和变异病毒的变异非常多见，包括毒力、耐药性、抗原性等很多方面。第67页,共76页，星期六，2024年，5月噬菌体一、噬菌体的生物学性状噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒，在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。病毒的特性：个体微小，可以通过细菌滤器没有完整的细胞结构，由蛋白质和核酸组成专性细胞内寄生的微生物分布极广第68页,共76页，星期六，2024年，5月形态个体小，需用电子显微镜观察蝌蚪形、微球形和丝形第69页,共76页，星期六，2024年，5月结构大多数噬菌体呈蝌蚪形，由头部和尾部两部分组成大肠埃希菌T4噬菌体，头部和尾部大肠埃希菌T2噬菌体蝌蚪形噬菌体结构模式图第70页,共76页，星期六，2024年，5月化学组成蛋白质构成噬菌体的头部的衣壳及尾部，保护核酸。核酸-遗传物质基因组大小2~200Kb核酸为DNA或RNA，大多数噬菌体的DNA为双链DNA，多数RNA噬菌体的RNA为线状单链。某些噬菌体含有异常碱基，如大肠埃希菌T2噬菌体以5-羟甲基胞嘧啶与糖基化的5-羟甲基胞嘧啶代替胞嘧啶；某些枯草芽胞杆菌噬菌体以尿嘧啶、5-羟甲基尿嘧啶代替胸腺嘧啶。第71页,共76页，星期六，2024年，5月二、噬菌体的增殖1.吸附和穿入有尾噬菌体吸附宿主后，借助尾部末端含有的一种类似溶菌酶的物质，在细菌细胞壁上溶一小孔，然后通过尾鞘的收缩，将头部DNA注入细菌体内，而蛋白衣壳留在菌细胞外。无尾噬菌体与丝形噬菌体可以脱壳的方式进入细菌细胞内。T-even噬菌体感染E.coil第72页,共76页，星期六，2024年，5月2.生物合成转录形成mRNA，转译成噬菌体所需的酶、调节蛋白和结构蛋白。以噬菌体核酸为模板，通过核酸多聚酶催化作用，大量复制子代噬菌体的基因核酸。3.成熟与释放蛋白质和核酸合成后，在细胞质内按一定程序装配成成熟的噬菌体。当子代达一定数目后，菌细胞突然裂解，释放出的噬菌体又能感染新的敏感细菌。有些丝形噬菌体以出芽方式逐个释放。第73页,共76页，星期六，2024年，5月三、噬菌斑及噬菌体效价分离：在液体培养基中，噬菌现象可使浑浊菌液变为澄清。在固体培养基中，适量噬菌体和宿主菌液混合后接种培养，培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。噬菌体的滴定一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成的，称为噬斑（plaque）。通过噬斑计数，可测知一定体积内的噬斑形成单位数目，即噬菌体的数量。常以每毫升噬菌体液能出现的噬菌斑（PFC/ml）表示噬菌体的效价或滴度。噬斑第74页,共76页，星期六，2024年，5月四、噬菌体的一步生长曲线烈性噬菌体在感染的初、中期，没有噬菌体繁殖的迹象，最后只有在宿主细胞破裂后才能看到噬菌体数目大量增加。此种繁殖过程为一步生长。可用一步生长曲线表示。方法如下：1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞；2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）；3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放的噬菌体感染其它细胞；4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量进行计数）；5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线。第75页,共76页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第76页,共76页，星期六，2024年，5月**菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明，有的呈绒毛状或絮状或网状等，菌体可沿培养基表面蔓延生长，由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈现红、黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰等多种颜色。霉菌的菌落霉菌的细胞呈丝状，在固体培养基上有营养菌丝和气生菌丝的分化，气生菌丝间没有毛细管水，故菌落与放线菌的接近。霉菌的菌落形态较大，质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取，角落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等。