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动物炭疽诊断技术
1范围
本标准规定了动物炭疽的临床诊断、细菌学检查、分子生物学及血清学诊断的技术方法、操作程序
和判定标准。
本标准适用于动物炭疽的诊断、检疫、监测、流行病学调查和环境样本中炭疽杆菌的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB19489实验室生物安全通用要求
GB/T18088出入境动物检疫采样
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
缩略语
下列术语及定义仅适用于本文件。
OIE:世界动物卫生组织(WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic
(法))
Anthrax:炭疽
Ascoli反应:环状沉淀试验
BHQ1:淬灭剂(BlackHoleQuencher®)
Ct值:在荧光定量PCR反应中,每个反应管中荧光信号量达到所设定的阈值经历的循环数(Cycle
threshold)
DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleicacid)
dNTPs:脱氧核苷三磷酸(Deoxy-RibonucleosideTriphosphate)
FAM:6-羧基荧光素(6-carboxy-fluorescein)
PCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)
qPCR:实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePolymeraseChainReaction)
TAE:乙二胺四乙酸醋酸缓冲(Tris-acetate-EDTAbuffer)
4临床诊断
4.1流行特点
炭疽为人兽共患传染病,各种家畜、野生动物及人对本病都有不同程度的易感性。草食动物最易感,
其次是杂食动物,再次是肉食动物,家禽一般不感染。
患病动物和因炭疽而死亡的动物尸体以及受其污染的土壤、草地、水和饲料都是本病的主要传染源,
炭疽芽孢对环境具有很强的抵抗力,其污染的土壤和场地可形成持久的疫源地。本病主要经皮肤、消化
道和呼吸道感染。
本病呈地方性散发流行。有一定的季节性,多发生在吸血昆虫多、雨水多和洪水泛滥的季节。
4.2临床症
4.2.1概述
对死因不明的突然死亡病例,或临床上体表出现局限性肿胀、高热、腹痛、兴奋不安或沉郁虚弱、
病情发展急剧,死后天然孔出血的病例,都应首先怀疑为炭疽。动物炭疽至少会有三种不同的表现形式:
最急性型,急性型,亚急性到慢性型。反刍动物最容易出现最急性型和急性型,马容易出现急性型,狗、
猫和猪容易出现亚急性到慢性型或出现局部病变。
4.2.2最急性型
在最急性型病例中,动物通常没有表现出任何症状而突然死亡,有临床症状的动物,在死前不久动
物体温升高至42℃,肌肉震颤、呼吸困难、粘膜充血等。很快出现持久性痉挛、倒地、死亡。死后有
时可见从天然孔流出凝固不良的血液。
4.2.3急性型
牛可能出现急性型临床症状,死前48h可见精神沉郁、厌食、发烧、呼吸急促、心跳加快、粘膜
充血、水肿等。马通常表现为急性型经过,临床症状随感染部位不同而有所变化,常出现肠炎和绞痛,
并伴随着高热和精神沉郁,通常在发病48h~96h内死亡。如果通过吸血
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