外周血细胞形态检验.ppt

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外周血细胞形态检查

赣州市妇幼保健院

丁克文

外周血细胞检查程序

涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检查汇报方式

外周血红细胞异常形态检查

大小、形态、染色与构造异常;点彩红细胞

外周血白细胞异常形态检查

中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞

血小板形态与寄生虫检查

血小板大小、形态、数量变化;寄生虫

外周血细胞检查程序

血涂片的制备

器材

清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片

操作

在玻片近一端

1/3

处,加一滴血液,握住另一张边缘

光滑的推片,以

30o

~45o

角使血滴沿推片迅速散开,

迅速、平稳地推进推片至载玻片的另一端。

注意事项

血膜呈舌状,头、体、尾分明

空气中晃动,尽快干燥;

37

恒温箱中促干

涂片的厚薄、长度与血滴大小(

10~20

μ

l

)与血片质量

1h

内染色或在

1h

内甲醇固定

对的清洁玻片

抗凝血或毛细血管血涂片;

EDTA

能制止

PLT

汇集

抗凝血液

4h

内涂片

血涂片染色

原理

瑞氏(

Wright

)染色法(经典染色法)

瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理

吸附作用。

试剂

瑞氏染液

瑞氏染料

0.1g

甲醇

AR

60ml

pH6.8

磷酸盐缓冲液(

pH6.4~6.8

磷酸二氢钾(

KH

2

PO4

0.3g

磷酸氢二钠(

Na

2

HPO4

0.2g

加少许蒸馏水溶解,再加至

1000ml

操作

加瑞氏染液数滴,固定血膜约

1min

滴加约等量的缓冲液与染液混合,

室温下染色

5~10min

用流水冲去染液

,

待干燥后镜检。

注意事项

PH

对细胞染色有影响。

未干透的血膜不能染色。

染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。

不能先倒掉染液,用流水冲去。

血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。

先在低倍镜下浏览全片,理解染色好坏和

细胞分布状况,观测有无异常细胞。

选择涂片体尾交界处染色良好的区域,在

油镜下计数

100

个白细胞,按其形态特性

进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。

注意事项

分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈

城垛状迂回移动,计数使不能反复和遗漏。

白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。

分类见有核红细胞,不计入

100

个白细胞内,以分类

100

个白细胞过程中见到多少有核红细胞汇报,并

注明所属阶段。

除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞

总数的

2%

。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的

嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在成果报

告中应对破碎细胞或不能识别细胞作合适描述。

分类中应注意观测成熟红细胞、血小板的形态、染

色及分布状况,注意有无寄生虫和其他异常所见。

白细胞形态变化较大,遇有疑问应请示上级主管或

主任进行核算,以减少错误。

异常红细胞形态检查

大小异常

正常红细胞大小较为一致,直径

6~9um

在多种贫血时,红细胞可出现大、小不

一。直径

10um

为大红细胞,

15um

巨红细胞,常见于巨幼贫、肝脏疾病等,

直径

6um

为小红细胞,多见于缺铁性贫

血等

直径相差

1

倍以上为大小不均

右图:大红细胞(上)

小红细胞(下)

(

中央苍白区扩大)

RBC

直径一般

6um

厚度

2.6um

呈小圆形,细胞中

心区蛋白含量较正常多。见

于遗传性球形红细胞增多症

25%

以上)

、自身免疫性

溶贫和异常

Hb

病(

HBS

HBC

病等)。

球形红细胞

红细胞呈椭圆形,横短,

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