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外周血细胞形态检查
赣州市妇幼保健院
丁克文
●
外周血细胞检查程序
涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检查汇报方式
●
外周血红细胞异常形态检查
大小、形态、染色与构造异常;点彩红细胞
●
外周血白细胞异常形态检查
中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞
●
血小板形态与寄生虫检查
血小板大小、形态、数量变化;寄生虫
讲
授
内
容
外周血细胞检查程序
血涂片的制备
●
器材
清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片
。
●
操作
在玻片近一端
1/3
处,加一滴血液,握住另一张边缘
光滑的推片,以
30o
~45o
角使血滴沿推片迅速散开,
迅速、平稳地推进推片至载玻片的另一端。
●
注意事项
★
血膜呈舌状,头、体、尾分明
★
空气中晃动,尽快干燥;
37
℃
恒温箱中促干
★
涂片的厚薄、长度与血滴大小(
10~20
μ
l
)与血片质量
★
1h
内染色或在
1h
内甲醇固定
★
对的清洁玻片
★
抗凝血或毛细血管血涂片;
EDTA
能制止
PLT
汇集
★
抗凝血液
4h
内涂片
血涂片染色
●
原理
瑞氏(
Wright
)染色法(经典染色法)
瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理
吸附作用。
●
试剂
★
瑞氏染液
瑞氏染料
0.1g
甲醇
(
AR
)
60ml
★
pH6.8
磷酸盐缓冲液(
pH6.4~6.8
)
磷酸二氢钾(
KH
2
PO4
)
0.3g
磷酸氢二钠(
Na
2
HPO4
)
0.2g
加少许蒸馏水溶解,再加至
1000ml
。
●
操作
★
加瑞氏染液数滴,固定血膜约
1min
。
★
滴加约等量的缓冲液与染液混合,
★
室温下染色
5~10min
。
★
用流水冲去染液
,
待干燥后镜检。
●
注意事项
★
PH
对细胞染色有影响。
★
未干透的血膜不能染色。
★
染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。
★
不能先倒掉染液,用流水冲去。
★
血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。
★
先在低倍镜下浏览全片,理解染色好坏和
细胞分布状况,观测有无异常细胞。
★
选择涂片体尾交界处染色良好的区域,在
油镜下计数
100
个白细胞,按其形态特性
进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。
血
涂
片
镜
检
●
注意事项
★
分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈
城垛状迂回移动,计数使不能反复和遗漏。
★
白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。
★
分类见有核红细胞,不计入
100
个白细胞内,以分类
100
个白细胞过程中见到多少有核红细胞汇报,并
注明所属阶段。
★
除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞
总数的
2%
。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的
嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在成果报
告中应对破碎细胞或不能识别细胞作合适描述。
★
分类中应注意观测成熟红细胞、血小板的形态、染
色及分布状况,注意有无寄生虫和其他异常所见。
★
白细胞形态变化较大,遇有疑问应请示上级主管或
主任进行核算,以减少错误。
异常红细胞形态检查
大小异常
正常红细胞大小较为一致,直径
6~9um
在多种贫血时,红细胞可出现大、小不
一。直径
10um
为大红细胞,
15um
为
巨红细胞,常见于巨幼贫、肝脏疾病等,
直径
6um
为小红细胞,多见于缺铁性贫
血等
。
直径相差
1
倍以上为大小不均
右图:大红细胞(上)
小红细胞(下)
(
中央苍白区扩大)
形
态
异
常
RBC
直径一般
6um
、
厚度
2.6um
,
呈小圆形,细胞中
心区蛋白含量较正常多。见
于遗传性球形红细胞增多症
(
25%
以上)
、自身免疫性
溶贫和异常
Hb
病(
HBS
、
HBC
病等)。
球形红细胞
红细胞呈椭圆形,横短,
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