10第十章-脂代谢紊乱检验.ppt

方法评价总误差≤12％不精密度：天间CV＜4％不准确度：用病人标本与参考方法(或可靠的同类试剂)比较，偏差≤±4％灵敏度：检测限为0.077mmol/L测定范围：0.077～14.2mmol/L此为NCEP提出的分析目标1.匀相测定法2.PVS沉淀法原理血清中聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚（PVS）选择性地沉淀LDL，离心后上清液中含HDL、VLDL和CM，用胆固醇测定酶试剂分别测定上清液和血清TC含量，二者之差即LDL-C含量2.PVS沉淀法方法评价PVS沉淀法是中华医学会推荐的血脂测定方法1.该法精密度中等水平，LDL-C的批内CV＜2.0％，批间CV＜3.0％2.测定上限值12.9mmol/L。受血清中高TG浓度的影响，TG＞4.5mmol/L时，有时会因VLDL沉淀不完全而出现结果偏低3.Friedewald（弗里德瓦尔德）公式计算法单位mg/dlLDL-C=TC﹣HDL-C﹣TG/5单位mmol/LLDL-C=TC﹣HDL-C﹣TG/2.2在血清中存在CM、血清TG＞4.52mmol/L(100mg/d1)、血清中存在异常β-脂蛋白、Ⅲ型高脂蛋白血症等脂代谢异常时不宜采用Friedewald公式法计算(三)LDL-C测定参考区间《中国成人血脂异常防治指南》提出的标准(2007)为:合适范围：＜3.37mmol/L边缘升高：3.37～4.12mmol/L升高：≥4.14mmol/L临床意义LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素由于TC水平同时也受HDL-C水平的影响，所以最好以LDL-C代替TC作为冠心病危险因素指标美国国家胆固醇教育计划成人治疗专业组规定以LDL-C水平作为高脂蛋白血症的治疗决策及其需要达到的治疗目标(三)LDL-C测定六、血清载脂蛋白测定血清apoA和apoB测定apoAⅠ是HDL的主要结构蛋白，约占HDL蛋白总量的64%；apoB100是LDL的主要结构蛋白，占LDL蛋白总量的95%。因此，apoAⅠ和apoB100可以直接反映HDL和LDL的含量血清apoAⅠ和B测定apoAⅠapoB决定性方法氨基酸分析无候选参考方法放射免疫分析ELISA法常规方法免疫化学法（RID、EIA、RIA、ELISA、INA、ITA）ITA（免疫透射比浊法）是目前最常用的方法，简单快速，可以自动化批量分析，可用生化自动分析仪测定，适合临床实验室应用免疫透射比浊法原理血清apoAⅠ和apoB分别与试剂中的特异性抗人apoAⅠ和apoB抗体相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生浊度。在波长340nm测定吸光度。浊度高低与血清标本中apoAⅠ和apoB的含量成正比血清apoAⅠ和B测定反应原理如下：apoAⅠ抗原+抗apoAⅠ抗体→抗原抗体复合物apoB抗原+抗apoB抗体→抗原抗体复合物产生浊度测定340nm吸光度抗原抗体复合物血清apoAⅠ和B测定免疫透射比浊法方法评价1．测定范围样本稀释：0.2～3.0g/L直接测定：0.2～2.5g/L2．灵敏度检测限为0.2g/L3．精密度自动分析：批内CV≤3.0％，批间CV≤5.0％；手工测定：批内CV≤5.0％，批间CV≤10.0％4．准确度偏差≤±10％5．干扰无明显干扰参考区间apoAⅠ平均值约1.40～1.45g/L，女性略高于男性，年龄变化不明显，血脂正常者多在1.20～1.60g/L范围内apoB水平不论男女均随年龄上升，70岁以后不再上升或开始下降。中青年人平均0.80～0.90g/L，老年人平均0.95～1.05g/L血清apoAⅠ和B测定临床意义apoAⅠ是HDL的主要结构蛋白，其含量可代表HDL的水平。HDL主要参与胆固醇从外周组织转动到肝脏，故HDL是动脉粥样硬化的保护因素即：apoAⅠ水平与高脂血症、冠心病危险性呈负相关血清apoAⅠ和B测定临床意义apoB是LDL的主要结构蛋白，其含量可代表LDL的水平。LDL主要功能是将胆固醇由肝脏运到外周组织，故血清LDL浓度过高引起动脉粥样硬化即：apoB水平与高脂血症及动脉粥样硬化呈正相关血清apoAⅠ和B测定【参考值】ApoAI：1.00～1.50g/L；ApoB：0.80～1.00g/L。【临床意义】ApoAI是HDL的主要结构蛋白，ApoB是LDL的主要结构蛋白，因此，ApoAI和ApoB可直接反映HDL和LDL的含量。在某些病理情况下，ApoAI与HDL和ApoB与LDL并非成正相关，因此，同时测定载脂