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禽流感诊断技术

1范

本文件规定了禽流感（包括高致病性禽流感）临床诊断、样品采集、保存与运输、病毒分离与鉴定、

血凝素凝集和血凝素抑制（HA和HI）试验、禽流感病毒RT-PCR试验和禽流感病毒实时荧光RT-PCR试验的

技术要求。

本文件适用于禽流感（包括高致病性禽流感）的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用本文

件。

GB/T19489实验室生物安全通用要求

NY/T765高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范

3缩略语和定义

下列缩略语和定义适用于本标准。

3.1

禽流感avianinfluenza；AI

由正黏病毒科ɑ流感病毒属的病毒（A型流感病毒）引起的一种以禽类为主的感染和/或疾病综合征。

3.2

高致病性禽流感highlypathogenicavianinfluenza；HPAI

由高致病性A型流感病毒，通常是由H5或者H7亚型，引起的以禽类为主的急性传染病。

3.3

血凝试验haemagglutination；HA

利用流感病毒表面的血凝素（hemagglutinin，HA）蛋白具有结合红细胞表面受体并使红细胞凝集

的特性而开展的红细胞凝集试验（haemagglutination，HA），可以用来检测流感病毒的含量。

3.4

血凝抑制haemagglutinationinhibition；HI

特异性抗体结合到流感病毒血凝素蛋白的抗原位点后能够抑制流感病毒血凝素与红细胞受体之间

的结合，进而抑制流感病毒凝集红细胞。利用此原理而开展的血凝抑制试验称为血凝抑制试验，可以测

定血清中针对某亚型流感病毒的特异性抗体效价。

3.5

静脉内接种致病指数intravenouspathogenicityindex；IVPI

一种判定流感病毒致病能力高低的方法。见附录C。

3.6

反转录-聚合酶链式反应reversetranscription-polymerasechainreaction；RT-PCR

一种用于放大扩增特定的RNA片段的分子生物学技术。先用反转录酶将RNA反转录为cDNA，然后以

cDNA为模板进行PCR扩增的过程。

3.7

实时荧光RT-PCRreal-timeRT-PCR

利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程的一种扩增核酸方法。

3.8

Ct/Cp值thresholdcycle/crossingpoint

每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环数。

4临床诊断

4.1易感动物

鸡、火鸡、鸭、鹅、鸽子、鹌鹑、雉鸡、鹧鸪、鸵鸟、孔雀等多种禽类易感，多种野鸟也可感染发

病。

4.2禽流感临床症状

4.2.1根据禽的种类、日龄、品种，所涉及病毒株的特性以及环境因素等影响因子的不同，在完全易

感的禽类中禽流感会有各种不同的临床表现，低致病禽流感可能无明显临床症状，或有轻微咳嗽、采

食和饮水量下降、产蛋下降等非典型症状。

4.2.2高致病性禽流感可能表现典型的临床症状，包括眼结膜发红、鼻流出分泌物、咳嗽、鼻涕和呼

吸困难等呼吸道症状，鼻窦和/或头部水肿，呆立，沉郁，饲料和水的摄入量明显减少，无羽毛的皮

肤、肉垂、肉冠紫绀，排黄、白、绿色稀便，并有未完全消化的饲料；脚鳞或有出血；产蛋下降，软

壳蛋、畸形蛋增多；。共济失调，有歪脖子等神经症状以及腹泻。有的无明显临床症状而突然死亡，

有的产蛋禽还包括产蛋量显著下降，并伴随着畸形蛋数量增加等现象。典型的特征是高发病率，伴随

着不明原因的迅速增加的死亡率。

4.2.3鸭、鹅等水禽除上述4.2.2症状较鸡轻外，还可见神经和腹泻症状；有时可见角膜发红、充血、

有分泌物，甚至失明。

4.3高致病性