QBT 2409-1998 化妆品中氨基酸含量的测定.docxVIP

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QB/T2409-1998

前言

本标准是按GB/T1.1—1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标

准编写的基本规定》进行编写。

本标准是根据氨基酸在一定pH条件下，与茚三酮反应生成蓝紫色化合物进行比色定量原理而制

定的。

本标准由国家轻工业局行业管理司提出。

本标准由全国化妆品标准化中心归口。

本标准起草单位：上海市日用化学工业研究所。

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中华人民共和国轻工行业标准

化妆品中氨基酸含量的测定

QB/T2409-1998

1范围

本标准规定了化妆品中氨基酸含量的茚三酮比色测定法。

本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。

本方法最小检测浓度为0.01%。

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均

为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T8170--1987数值修约规则

3原理

蛋白质物质经水解成氨基酸，而氨基酸在一定的pH条件下，与茚三酮反应生成蓝紫色化合物，对

其进行比色定量测定，从而计算出相应的氨基酸含量。

4试剂

分析中应使用分析纯(AR)试剂，试验用水应为蒸馏水或纯度相当的水。

4.12%茚三酮溶液

称取茚三酮(HG3—984)1.0g,溶于一定量热水中，待冷却后定容至50mL。该溶液每隔(2～3)天需

重新配制。

4.2磷酸盐缓冲溶液(pH=8.04)

4.2.11/15mol/L磷酸二氢钾溶液

称取磷酸二氢钾(GB/T1274)9.070g,溶于水中后定容至1L。

4.2.21/15mol/L磷酸氢二钠溶液

称取磷酸氢二钠(GB/T1263)23.876g,溶于水中后定容至1L。

4.2.3取4.2.1溶液5.0mL于100mL容量瓶中，用4.2.2溶液稀释至刻度，摇匀。

4.3盐酸(GB/T622)6mol/L溶液

4.4氨基酸标准溶液(200μg/mL)

准确称取白氨酸(L-Leucine含量不小于98%)0.2000g,用水溶解并定容至100mL,摇匀后再吸取

10mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度。

4.5蜡块

蜂蜡与石蜡之比为1:9。

5仪器

5.1分光光度计：波长范围400nm～700nm。

国家轻工业局1998-11-25批准

1999-06-01实施

QB/T2409-1998

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5.2酸度计：分度值0.02。

5.3电磁搅拌器。

5.4容量瓶：100,1000mL。

5.5移液管：1,2,5,10mL。

5.6水浴锅。

5.7试管：30mm×200mm。

5.8分析天平：分度值0.0001g。

5.9刻度试管：25,100mL。

5.10烧杯：100mL。

6测定步骤

6.1标准曲线的绘制

准确移取氨基酸标准溶液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL(相当于氨基酸0,40,80,120,160,200μg)分别置于25mL刻度试管中，加水补充至4mL,然后各加入2%茚三酮溶液和磷酸盐缓冲溶液各1mL,摇匀。置沸水浴中加热15min,取出冷却至室温，加水至刻度，摇匀。静置15min,用分光光度计在570nm

波长下以水作参比，用1cm比色皿测定试液的吸光度，绘制吸光度对氨基酸含量(pg)的标准曲线。

6.2样品前处理

准确称取样品约5g(准确至0.001g)于试管，加入6mol/L盐酸溶液约10mL～20mL于沸水浴中水解约6h(对乳化体可先将试样置于沸水浴中破乳1h～2h)。加入约1g～2g蜡块约30min后，取出试管冷却。去除蜡块，将溶液移至100mL烧杯中，在酸度计上用碱液调节pH至7.5～8.0,再将溶液移入

100mL容量瓶中并加水稀释至刻度，摇匀待用。

6.3测定

移取试液(6.2)1mL～4mL置于25mL刻度试管中，以下按6.1测定步骤进行。测得吸光度，通过标

准曲线计算氨基酸的含量，同时做一空白样。

7结果表示

样品中氨基酸含量(以白氨酸计)按式(1)进行计算：

(1)

式中：C?——从标准曲线上查得样品的氨基酸的量，μg;

C?——从标准曲线上查得空白样的数值，pg;

V——移取样品溶液的量，mL;

m——样品量，g。

所得结果按GB/T8170修约用两位小数表示。

8精密度

两次平行测定结果之差应不大于其平均值的10%。