全国艾滋病检测技术规范要点专家讲座.pptx

《全国艾滋病检测技术规范》关键点

;一、??特点概述;2.对原有章节修改和完善：样品采集和处理，HIV抗体检测（目标、关键点、方法及结果汇报）,HIVP24抗原检测（方法、结果汇报和解释），艾滋病检测试验室安全防护等。

3.配合VCT(自愿咨询检测)和当前防治工作需求，新增了以下内容:HIV抗体检测替换策略，婴幼儿HIV感染诊疗，HIVRNA定量测定（病毒载量测定），CD4+/CD8+T淋巴细胞检测，职业暴露预防和补充试验室意外事故紧急处理办法。

4.按技术规范要求，对每章内容均标明了“范围”和“规范性引用文件”。

;一、??对原有章节修改和完善：;（2）应依据试验要求选取适当抗凝剂：如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选取K3EDTA或肝素或枸橼酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选取K3EDTA或枸橼酸钠。

（3）样品保留

用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品不能长久保留，样品采集时间超出48h则不可检测。

;（4）样品运输

应采取WHO提出三级包装系统：

第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖试管内，试管上应有显著标识，标明样品编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。

第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，能够装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖容器内，容器材料要易于消毒处理。

第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。;（5）样品接收

打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。

样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。

假如污染过重或者认为样品不能被接收，则应将样品安全废弃。并要将样品情况马上通知送样人。;2．HIV抗体检测;（2）HIV抗体检测试验室

应符合《全国艾滋病检测工作规范（1997年版）》中对检测试验室人员、建筑设施和设备等条件要求。

应符合《试验室生物安全通用要求》（GB19489-）对II级生物安全试验室（BSL-2）各项要求。

;（3）HIV抗体检测目标和关键点

HIV抗体检测目标：HIV抗体检测可用于监测、诊疗、血液筛查。

以监测为目标检测是为了解不一样人群HIV感染率及其改变趋势而进行检测，检测人群包含各类高危人群和普通人群。

以诊疗为目标检测是为了确定个体HIV感染情况而进行检测，包含临床检测和自愿咨询检测、术前检测、依据特殊需要进行体检等。

以血液筛查为目标检测是为了预防输血传输HIV而进行检测，包含献血员筛查和原料血浆筛查。

;HIV抗体检测关键点：

筛查试验阳性不能出阳性汇报。

严格恪守试验室标准操作程序（SOP）。

严格按照试剂盒说明书操作。

注意预防样品间交叉污染。;（4）HIV抗体检测筛查方法

惯用筛查方法是酶联免疫试验（ELISA）

快速检测（RT）及其它检测

伴随对HIV感染者和AIDS病人抗逆转录病毒治疗进展，及对无症状HIV感染者提供自愿咨询检测（VCT）迫切需求，简便、快速HIV检测方法被广泛应用。惯用主要有以下几个：;①明胶颗粒凝集试验（PA）：

PA是HIV血清抗体检测一个简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温（普通为室温）。

当待检样品含有HIV抗体时，经抗原致敏明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应，依据明胶颗粒在孔中凝集情况判读结果。

PA试剂有两种，HIV-1和HIV-2抗原共同致敏PA试剂（AFDHIV-1/2PA），已经我国食品药品监督管理局（SFDA）注册同意；HIV-1、HIV-2抗原分别致敏PA试剂（SERODIA-HIV-1/2）可初步区分HIV-1型和HIV-2型，当前我国还未引进。;②斑点EIA（dot-EIA）：以硝酸纤维膜为载体，将HIV抗原滴在膜上成点状，即为固相抗原。加血清样品作用，以后步骤同ELISA。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10min以内，使用抗原量少。

;③斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：

与斑点EIA相同，也是以硝酸纤维膜为载体。区分在于不用酶标识抗体，而代之以红色胶体金（或胶体硒）A蛋白，用渗滤（或层析）法作为洗涤方法。

试剂稳定，可室温长久保留。试验时不需任何设备，快速、简便、特异性很好，敏感性约相当于中度敏感ELISA，适合用于应急检测、门诊急诊个体检测。

当前已经有在国内被SFDA同意注册国外进口试剂和国内产品。普通可在10?30min内判读结果。

;④艾滋病唾液检测卡：

在硝酸纤维膜上包被人工合成HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含