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细胞因子对实验性自身免疫性肌炎淋巴细

胞B7表达的影响

作者:陶唯宜肖波彭永杨欢李静谢光洁

【关键词】细胞因子

【摘要】目的探讨B7在实验性自身免疫性肌炎(EAM)发病中

的作用及γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介

素-10(IL-10)、IL-12对其的影响。方法用兔肌肉匀浆免疫小鼠建

立EAM模型,观察动物发病情况及肌肉病理改变。取小鼠外周血和脾

淋巴细胞进行细胞培养并用细胞因子处理,分别应用流式细胞计和逆

转录聚合酶链反应(PCR)检测外周血和脾淋巴细胞B7-1,B7-2蛋白

和mRNA的表达及细胞因子对其影响。结果EAM小鼠外周血和脾淋巴

细胞上B7-1、B7-2蛋白的表达明显增强,B7-1、B7-2mRNA的表达与

蛋白表达的增加相平行。IFN-γ、TNF-α、IL-12使上述表达明显增

强,IL-10则抑制其表达。结论B7表达与EAM的发病密切相关,细

胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-12可能通过调节EAM小鼠淋巴

细胞B7表达而影响EAM的转归。

关键词细胞因子B7分子EAMRT-PCR流式细胞计

【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectsofIFN-γ,

TNF-α,IL-10andIL-12ontheB7mRNAandproteinexpressionof

lymphocyteinexperimentalautoimmunemyositis(EAM).Methods

1/7

FACSandRT-PCRtech

2/7

ˉniqueswereusedtoassaytheexpressionofB7inEAM

lymphocytesandeffectsofcytokines.ResultsIFN-γ,TNF-α

andIL-12increasedtheexpressionofB7,butIL-10inhibitedall

theexpressions.ConclusionIFN-γ,TNF-α,IL-10and

IL-12effectedtheB7expressioninEAMlymphocytes.

KeywordscytokineB7EAMRT-PCRflowcytometry

实验性自身免疫性肌炎(EAM)是一种人工诱导类似人类多发性

肌炎(PM)的动物模型,其病理改变与PM基本一致,即肌纤维的坏

死和炎性细胞浸润。已有的研究表明PM发病与T细胞的异常活化有

关[1,2]。T细胞的活化需要第一信号和第二信号参与,第二信

号又称协同刺激信号,主要由T细胞上表达的CD28/CTLA-4与抗原递

呈细胞(APC)表面的配体B7相互作用所提供[3]。本实验着重

观察B7在EAM中的表达以及IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-α对其影

响,试从T细胞活化的角度探讨PM的发病机制。

1材料与方法

1.1材料PE标记的抗B7-1、B7-2单克隆抗体购自美国

Pharmingen公司,IL-10、IL-12、rIFN-γ、rTNF-α、RNA提取试剂

盒及逆转录试剂盒购自美国Promega公司,B7-1、B7-2、β-actin

引物由中科院上海细胞生物研究所合成,弗氏完全佐剂(CFA)及其

它免疫试剂购自北京邦定生物公司。1.2方法

1.2.1动物模型和分组健康

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