DNA生物合成公开课获奖课件.pptx

DNA复制AllRightReservedbyLiuwanh重庆科技学院化学化工学院第1页

课程：生物化学中心法则重点知识回忆DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代；通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物表型。DNA复制、转录和翻译过程就构成了遗传学中心法则。第2页

课程：生物化学DNA双螺旋构造重点知识回忆DNA合成原料是dNTP核苷酸经过磷酸3，5-二酯键连接DNA中碱基互补配对第3页

课程：生物化学DNA双螺旋构造重点知识回忆1.主干链反向平行2.侧链碱基互补配对3.立体构象双螺旋第4页

课程：生物化学问题提出1DNA为何需要复制？2DNA复制过程有没有共性？3DNA复制过程怎样？第5页

课程：生物化学本章内容第5节：DNA损伤与修复第4节：逆转录和其他复制方式第3节：DNA复制过程第2节：DNA复制酶学第1节：复制基本规律内容提纲第6页

课程：生物化学第1节.复制基本规律1.1半保留复制1.1半保留复制概念半保留复制（semiconser-vativereplication）：DNA在复制过程中合成新链与亲代DNA分子碱基次序完全一样。因为子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成，这种复制方式称为半保留复制。复制亲代DNA子代DNA新合成子链第7页

课程：生物化学第1节.复制基本规律1.1半保留复制半保留复制试验证据以15NH4Cl为唯一氮源培养大肠杆菌，使其DNA全部变成[15N]DNA；Step1Step2Step3Step4将上述细菌转入普通培养基（含14NH4Cl）培养；提取各代细菌中DNA分子；氯化铯密度梯度离心，分析沉降区域密度。米西尔逊-斯塔尔试验第8页

课程：生物化学第1节.复制基本规律1.2复制子与复制方向概念复制子(replicon)：复制子是独立完成复制功效单位。习惯上把两个相邻DNA复制起始点之间距离（或DNA片段）定为一个复制子。单向复制双向复制复制方向第9页

课程：生物化学第1节.复制基本规律1.3需要引物知识点参与DNA复制DNA聚合酶，必须以一段具有3’端自由羟基（3’-OH）RNA作为引物(primer)，才能开始聚合子代DNA链。RNA引物大小，在原核生物中一般为50-100个核苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物碱基次序，与其模板DNA碱基次序相配对。第10页

课程：生物化学第1节.复制基本规律1.4半不持续复制3?5?3?5?3′5′3′5′解链方向领头链(leadingstrand)随从链(laggingstrand)3′5′第11页

课程：生物化学第1节.复制基本规律1.4半不持续复制概念领头链(leadingstrand）以3’→5’方向亲代DNA链作模板子代链在复制时基本上是连续进行，其子代链聚合方向为5’→3’，这一条链被称为领头链(leadingstrand)。随从链(laggingstrand)以5’→3’方向亲代DNA链为模板子代链在复制时则是不连续，其链聚合方向也是5’→3’，这条链被称为随从链(laggingstrand)。冈崎片段(Okazakifragment)因为亲代DNA双链在复制时是逐步解开，所以，随从链合成也是一段一段。DNA在复制时，由随从链所形成一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazakifragment)。第12页

课程：生物化学第2节：DNA复制酶学DNA复制体系复制是在酶催化下核苷酸聚合过程,需要多种物质共同参与:底物：dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)； 模板(template)：解开成单链DNA母链； 引物(primer)：提供3′-OH末端寡核苷酸（RNA分子）；聚合酶(polymerase)：依赖DNADNA聚合酶，简写为DNA-pol或DDDP； 其他酶和蛋白质因子 DNA复制体系第13页

课程：生物化学第2节：DNA复制酶学1.解旋解链酶①拓扑异构酶（解超螺旋酶）：解开DNA超螺旋②解链酶（解螺旋酶）：解开碱基对之间氢键，形成2股单链③单链DNA结合蛋白：结合于单股DNA链，制止DNA复性,防止单链被核酸酶水解（辅助因子，非酶）2.引物酶：合成一小段RNA引物，用于DNA聚合酶延长子链3.DNA聚合酶：在5’端由RNA（或DNA）前提下，延长DNA子链4.DNA连接酶：在随从链合成过程中，将不持续DNA子链片段连接第14页

课程：生物化学第2节：DNA复制酶学2.1解旋解链酶拓扑异构酶第15页

课程：生物化学第2节：DNA复制酶学2.1解旋解链酶解链酶解螺旋酶(helicase)，又称解链酶或rep蛋白，运用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链