家畜繁殖学第八章 配子与胚胎生物工程.ppt

;;;;本节重点;;;;;;充分发挥优良母畜的繁殖潜力。;;母畜发情后生殖器官的孕向发育;;;;;;〔二〕影响妊娠率的因素;

;;概念、意义及

开展历史;;2、开展历史;;;;;二、体外受精的根本操作程序;

1、离体卵巢采卵：从屠宰母畜的卵巢上采

集卵母细胞

;;1〕培养液：用于卵母细胞体外成熟的最为广泛根底培养液是M199。培养时尚要参加一定的血清和激素。

2〕温度和气相：牛、猪、羊和马等家畜的卵母细胞体外成熟培养的温度一般为38～39℃。所有哺乳动物卵母细胞体外成熟培养的气相一般要求在含5％C02的空气和最大湿度的环境。

3〕培养时间：牛和羊卵母细胞体外成熟培养的时间一般为22～24h，而马为30～36h，猪为40～44h。

4〕培养方法：卵母细胞体外成熟的培养方法一般采用微滴法、封闭法和开放法三种。;;;;〔二〕存在的问题和开展方向;;;;;定义：是指由一个细胞或个体以无性繁殖

〔asexualreproduction〕或孤雌生殖而产生方

式产生遗传物质完全相同的一群细胞或一群个

体。

内容：

;;;卵裂球培养示意图;;;;;;二、单个卵裂球别离培养;三、细胞核移植;〔一〕开展史;2、体细胞核移植;;;〔二〕细胞核移植的操作程序

;;;2、核受体细胞的准备;选择细胞：采用去核的MII期卵母细胞作为受体胞质。

去核：受体MII期卵母细胞需要进行去核。

方法：盲吸法，荧光引导去核法，微分干预及极性显微镜去核法，离心去核法，化学试剂去核法，末期去核法，吸引法去核，挤压法去核，点击法去核

;荧光引导去核法

用Hoechst33342〔2～8mg/ml〕染色10～15min，

然后在荧光显微镜下确定核的位置;离心去核法：根据细胞核的密度大于细胞质，用离心的方法可使没有透明带的卵母细胞核被甩向一侧而最后脱离卵母细胞。

化学试剂去核法：用化学试剂处理处于第一次减数分裂中期的小鼠卵母细胞，使染色体相互紧密结合，形成染色体复合体，在卵母细胞排出PB1时，染色体复合体随PB1一起排出。

末期去核法：激活处理成熟卵母细胞，使其排出PB2，然后吸取其周围附近的细胞质。

吸引??去核：在注入核供体的同时吸引除掉原有卵母细胞核。;挤压法去核

在PB1附近，将透明带切开，调准切口，固定卵

母细胞，使切割针与其成垂直方向，向下挤压除

去PB1连同下面的一小局部细胞质;点击法去核

在PB1附近，将卵母细胞透明带切开1/3，调准切口，

使其与切割针成垂直方向，固定卵母细胞，用显微

针点击透明带，除去PB1连同下面的一小局部细胞质。;

1〕化学法

2〕仙台病毒法

3〕电融合法;

1〕化学激活

⑴7%乙醇：处理时间5～7min

⑵离子霉素：4umol/L，5min

⑶钙离子载体〔A23187〕：5umol/L，5min

⑷6-DMAP：1.9～2.0mmol/L；3～5h或更长

⑸星形胞菌素：2umol/L；15～30min

2〕电激活

;;

结果不稳定，效率低〔1～6%〕；

克隆动物怀孕期长、出生体重异常偏大、

生后对环境的适应性差；

存活率低

细胞质的遗传问题;;核移植产生的弥猴;;;;十大神奇转基因动物;;;翡翠海参看起来更像一片树叶，而不是黏滑的腹足软体动物，但它却是第一种在自然演化过程中发生转基因现象的物种。这种生物令很多科学家大惑不解。就像缅因大学的玛丽-朗波发现，它们居然能够利用水藻食物中的叶绿体进行光合作用以产生能量。没有任何其他动物能够这样利用叶绿体。

朗波研究发现海参中的一种基因与水藻中具有光合作用的基因类似，这说明在过去的漫长岁月中，该基因或许通过自然进化的方式从水藻转移到海参的DNA中。虽然目前还很难证实海参身上的这种基因转移，但朗波仍表示“我们正致力于探究这种转移是如何发生的〞，这将有利于科学家探索动植物间的基因转移是否会发生在其他的物种上。;;蚊子属于昆虫纲双翅目蚊科，全球约有3000种，是一种具有刺吸式口器的纤小飞虫。