利用可转化大片段基因组发掘野生稻有利基因的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1594564A

(43)申请公布日2005.03.16

(21)申请号CN200410023348.9

(22)申请日2004.06.25

(71)申请人湖南西城杂交水稻基因科技有限公司

地址410013湖南省长沙市岳麓区望岳街道窑塘村一组

(72)发明人曹孟良

(74)专利代理机构长沙市融智专利事务所

代理人颜勇

(51)Int.CI

C12N15/10

C12N15/29

C12N15/82

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

利用可转化大片段基因组文库发掘

野生稻有利基因的方法

(57)摘要

本发明公开了一种利用可转化大片

段基因组文库发掘野生稻有利基因的方

法，它包括构建野生稻可转化大片段基因

组文库，通过转基因技术将大片段克隆导

入到栽培稻中，建立全基因组基因敲入突

变体库。通过对突变体中大片段克隆控制

的性状和遗传模式的田间筛选，获得产

量、抗性、品质等性状得到显著改良的转

基因突变体水稻新材料。同时，含有有利

基因的大片段克隆一经鉴定，即可快速用

于其它栽培稻品种，使现有水稻品种得到

整体改良。这一技术也适用于发掘其他植

物基因资源。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.利用可转化大片段基因组文库发掘野生稻有利基因的方法，其特征在于，包括如

下步骤：

a.供体野生稻可转化大片断基因组文库的建立；

b.通过转基因技术将可转化大片断基因组文库导入受体栽培稻，获得全基因组突变

体库；

c.对突变体库进行筛选，获得农艺性状改良的突变体植株及控制优良性状的野生稻

有利基因。

2.根据权利要求1所述的利用可转化大片段基因组文库发掘野生稻有利基因的方法，

其特征在于，供体植物可转化大片断基因组文库为双元细菌人工染色体库或可转化

人工染色体库。

3.根据权利要求1所述的利用可转化大片段基因组文库发掘野生稻有利基因的方法，

其特征在于，供体野生稻可转化大片断基因组文库的构建是按琼脂包埋法制备

Megebase级的大片段水稻DNA，再利用可转化人工染色体载体或者双元细菌人工

染色体载体构建大片段基因组文库。

4.根据权利要求1所述的利用可转化大片段基因组文库发掘野生稻有利基因的方法，

其特征在于，所述的转基因技术为农杆菌介导、基因枪、花粉管通道、穗颈注射中

的一种。

5.根据权利要求1所述的利用可转化大片段基因组文库发掘野生稻有利基因的方法，

其特征在于，供体植物为野生稻，受体植物为栽培稻。

说明书

技术领域

本发明属于水稻品种改良及育种技术领域。涉及大规模发掘和利用野生稻有利基因

资源的分子生物学技术及基因工程技术领域。

背景技术

野生稻中蕴含丰富的有利基因。野生稻基因资源的成功挖掘、利用曾带来了世界的

第一次和第二次绿色革命。从野生稻中转育矮秆基因到栽培稻带来了第一次绿色革

命；杂交水稻被誉为我国的第五大发明，三十多年前，袁隆平院士最先从野生稻中

发现野败不育基因才成功培育了杂交水稻，开创了第二次绿色革命。野生稻由于长

期处于野生状况，经受各种灾害和不良环境的选择，具有对各种病虫害的抗性和各

种逆境的适应性，如抗病、抗虫、耐寒、耐旱、耐盐碱、耐淹、耐荫以及高产、优

质、雄性不育、磷钾高效利用等性状都是水稻遗传改良的重要基因资源。

野生稻有利基因可为栽培稻所利用。稻属(Oryza)有20～25个分化很好的种，稻属

各种染色体组型划分为AA、BB、CC、BBCC、CCDD、EE、FF、GG、和HHJJ，

只有两个种即普通栽培稻(Oryzasativa)和光身稻(O.glabe