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核酸;;组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为β-D-2-脱氧核糖;RNA所含的糖则为β-D-核糖。;碱基;嘧啶;;修饰碱基的简写符号;取代基用下列小写英文字母表示:;例:;(2)单核苷酸各组分的连接方式;(3)单核苷酸的种类;多聚核苷酸是通过一个核苷酸的C3’-OH与另一分子核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。;1.DNA的结构;核酸一级结构的表示方法;二、DNA的二级结构
DNA的双螺旋模型;DNA双螺旋模型要点;碱基配对与氢键形成;类型;(3)DNA的三级结构
A.原核生物DNA的三级结构;B.真核生物DNA的三级结构;组蛋白与核小体;核小体结构;;(三)核酸的理化性质;2.核酸的紫外吸收特性;;3.核酸的变性和复性;例:变性引起紫外吸收值的改变;DNA的变性过程是突变性的,它在很窄的温度区间内完成。因此,通常将紫外吸收的增加量达最大量一半时的温度称熔解温度,用Tm表示。
一般DNA的Tm值在70-85?C之间。DNA的Tm值与分子中的G和C的含量有关。
G和C的含量高,Tm值高。因而测定Tm值,可反映DNA分子中G,C含量,可通过经验公式计算:
(G+C)%=(Tm-69.3)X2.44;;(2)核酸的复性;用于密度测定或混合物的分离;;应用:分子杂交;种类:1
1975年英国分子生物学家E.M.Southern首先发明的一种杂交“印迹法”——Southern印迹法(Southernbloting:DNA-DNA)。;6.洗涤除去杂交标记物。
7.将膜烘干后进行放射自显影。;;种类:2
1977年G.RStark建立了测定RNA的分子杂交技术——Northern印迹法(Northernbloting:DNA-RNA)。;DNA-DNA
杂交双链分子;种类:3
用类似的方法,根据抗体与抗原可以结合的原理,开发了分析蛋白质的方法——Western印迹法(Westernbloting:抗原-抗体)。;
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