DNA连接酶说明书(精品).pdf

CodeNo.6022

研究用

Takapa

说明书

内容

es制品说明

。制品内容

e保存

e使用注意

e使用方法及示例

A.向质粒载体中插入DNA片段

B.线性DNA的自身环化(分子内连接)

C.接头(Linker,Adaptor)连接

eeQA

e使用例

。参考文献忆mN

。制品说明

本试剂盒是用于快速DNA连接反应的简易系统。在本试剂进行连接反应时,只需要加入一种包含T4DNA

Ligase和最适buffer的酶溶液，终反应液体积小。因为反应高效，大多数连接反应只需3分钟，较难的反

应也可在30分钟内完成。

转化之前在连接混合液中加入Solution川(转化增强剂)有助于提高转化效率。如果目的DNA含量低或预

期的连接效率较低，建议使用Solution川。连接反应液不必经过DNA纯化，可直接用于细菌的转化。

试剂使用比例

Ver.2.1

试剂使用比例

环状DNA连接时:

向质粒载体中插入外源DNA片段;DNAsolution:1

向质粒载体中插入接头DNA;Solution1:1

自身环化。

线型DNA连接时:DNAsolution;1

向和-噬菌体载体中插入外源DNA片段*;Solution1:1

cDNA与接头(Linker,Adaptor)连接。Solution1:2

*:建议使用TaKkaRaDNALigationKitVer1(CodeNo.:6021)进行实验。

e制品内容

Solution1:EnzymeSolution3x250川

Solution儿:ConcatenationBuffer1x750串

Solution川:TransformationEnhancer1x200咱

*如果每次使用7.5hlSoclution|，可反应100次。

se保存

-20C。Solution川融化后室温保存，如果产生沉淀，可涡旋数分钟溶解。

。使用注意

1试剂盒中的Solution1和Solution1建议-20C保存，反复冻融不会失活。Solution|因含有T4DNA

Ligase,使用前请在冰中融化并轻柔混与。Solution1可在室温融化并混匀。Solution川一且融化，就

应于室温保存,若有沉淀，使用前请涡旋溶解。

2DNA连接液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如要进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时,建议使用乙醇沉淀法*浓缩

DNA，请不要用