ISO 9308-3-1998水质—地表水和废水大肠埃希氏菌和大肠菌群的检测和计数— 第 3 部分在液体培养基中接种的小型化方法（最可能数）.pdf

国际标准ISO

9308-3

第一次编辑

1998-11-15

水质—地表水和废水大肠埃希氏菌和大肠菌群的检

测和计数—

第3部分：

在液体培养基中接种的小型化方法（最可能数）

参考编号

ISO9308-3:1998(E)

国际标准ISO9308-3:1998(E)

水质—地表水和废水大肠埃希氏菌和大肠菌群的检测和计数—

第3部分：

在液体培养基中接种的小型化方法（最可能数）

1范围

ISO9308这部分规定了一种通过接种到液体培养基中，检测和计数地表水和废水中大肠

埃希氏菌的方法。该方法适用于所有类型的水。

该方法不适用于饮用水和原则上每100ml中少于15个细菌的其他类型的水。

该方法不适用于大肠埃希氏菌以外的大肠菌群的计数与检测。

2引用标准

通过引用下列规范性文件的内容，构成了本国际标准。对标准日期的参考文献，不适用

于这些出版物的后续修订或修改。不过，鼓励基于该国际方法的协议各方，调差最新版本的

规范性文件的可用性，对于未标注日期的参考文献，适用于最新版本。ISO及IEC成员维护

现行有效的国际标准。

ISO3951，不合格变量检验的抽样程序及图表

ISO5667-1，水质——采样——第1部分：采样方案设计指南

ISO5667-2，水质——采样——第2部分：采样技术指南

ISO5667-3，水质——采样——第3部分：样品储存和处理指南

ISO/IEC指南2：标准化和相关活动——词汇

3术语与定义

就ISO9308这部分而已，术语和定义在ISO/IEC指南2中给出，如下，

3.1大肠埃希氏菌

E.coli

β-D-葡萄糖醛酸苷酶阳性微生物在含有4-甲基伞状酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG）的培

养基中44℃培养可生长。

4原则

稀释后的样品接种在一排含有脱水培养基的微孔板中。

微孔板在44℃±0.5℃最少36h最多72h培养后，在阴暗处于366nm紫外光下检查。水

解MUG产生荧光表明存在大肠埃希氏菌。结果给出每100ml最可能数（MPN）。

5设备

除无菌设备外，玻璃器皿应按照ISO8199中的说明进行灭菌。

常用和特殊的微生物实验室设备：

5.1干热（烘箱）或蒸汽（高压釜）灭菌设备

5.2恒温培养箱44℃±0.5℃

5.3隧道式或垂直层流式（最好为Ⅱ级）干燥机

5.4紫外观察室（伍德灯，366nm）

警告：UV光会刺激眼睛和皮肤，使用防护眼镜和手套。

5.5便携式折光计（可选）

5.6pH计，精度±0.1

5.7试管，尺寸16mm×160mm和20mm×200mm，或同等容量的烧瓶。

5.88道移液枪，可调节的或固定值的或任何其它使用的系统，用于测量和分配每孔200μL。

5.9无菌枪头。

5.10符合ISO8199的膜过滤系统，包括0.2μm孔径的滤膜，用于液体培养基的灭菌。

5.11无菌微孔板，96孔，350μL，平底无荧光。

5.12用于微孔板的无菌密封胶条。

5.13无菌平皿，直径90mm。

6采样

依据ISO8199，ISO5667-1，ISO5667-2和ISO5667-3，取样和运送样品到实验室。

7培养基和稀释剂

7.1总述

为保证结果的可重复性，制备培养基和试剂，使用质量和成分一致的以重新鉴定过的分

析级化学品，或按