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核酸的生物合成专题知识讲座核酸的生物合成专题知识讲座第1页
2DNA是生物遗传主要物质基础,生物机体遗传信息以密码形式编码在DNA分子上,表现为特定核苷酸排列次序,并经过DNA复制由亲代传递给子代。在后代生长发育过程中,遗传信息自DNA转录给RNA,然后翻译成特异蛋白质,以执行各种生命功效,使后代表现出与亲代相同遗传性状。中心法则1964-1970劳氏肉瘤病毒遗传方式致癌RNA病毒、植物RNA病毒病毒(复制)复制转录DNARNA蛋白质翻译逆转录1958年,遗传信息单向遗传信息传递核酸的生物合成专题知识讲座第2页
3自我复制转录反转录自我复制翻译蛋白质核酸的生物合成专题知识讲座第3页
4复制:亲代DNA或RNA在一系列酶作用下,生成与亲代相同子代DNA或RNA过程。转录:以DNA为模板,按照碱基配对标准将其所含遗传信息传给RNA,形成一条与DNA链互补RNA过程。翻译:亦叫转译,以mRNA为模板,将mRNA密码解读成蛋白质AA次序过程。逆转录:以RNA为模板,在逆转录酶作用下,生成DNA过程。Reversetranscription核酸的生物合成专题知识讲座第4页
5第一节DNA生物合成
DNA复制(DNA指导下DNA合成)逆转录(RNA指导下DNA合成)DNA突变DNA损伤与修复(修复合成)核酸的生物合成专题知识讲座第5页
6一、DNA半保留复制(一)定义和试验证据:由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成,这种复制方式叫半保留复制。半保留复制试验证据:1958年Meselson和Stahl用同位素15N标识大肠杆菌DNA,首先证实了DNA半保留复制。核酸的生物合成专题知识讲座第6页
7DNA半保留复制生物学意义:DNA半保留复制表明DNA在代谢上稳定性,确保亲代遗传信息稳定地传递给后代。DNA在代谢上稳定性并非指DNA是一个惰性物质:在细胞内外各种物化因子均可造成DNA损伤,需要修复;在复制和转录过程中DNA会发生损耗,必须进行更新;在发育和进化过程中DNA可能进行修饰、删除、扩增和重排;在进化角度上,DNA更是处于不停变异和发展中。核酸的生物合成专题知识讲座第7页
8(二)复制起点、方向和方式1、复制起点(origin,ori或o,复制原点)复制起点:复制开始处DNA分子特定位置.复制子(Replicon)(复制单位):从一个起点到一个终点所包含DNA区域,是基因组独立进行复制单位。核酸的生物合成专题知识讲座第8页
9原核生物染色体和质粒、真核生物细胞器DNA是环状双链分子,它们都只有一个固定复制起点,都是单复制子。真核生物染色体DNA是线形双链分子:有多个复制起点,是多复制子,每个复制子约有100-200Kbp。人体细胞平均每个染色体含有1000个复制子。病毒DNA各种多样,环状或线形,双链或单链,但都是单复制子。许多生物复制起点都是富含A、T区段。核酸的生物合成专题知识讲座第9页
102、复制方向及方式复制叉(Replicationfork):DNA复制进行时,在眼两侧出现两个叉子状生长点(growthpoint),叫复制叉。在复制叉上分布着各种与复制相关酶和蛋白因子,它们组成复合物称为复制体(replisome)大多数复制是双向,形成两个复制叉;真核染色体DNA线环状双链E.coli染色体DNA环状双链复制眼(replicationeye):电子显微镜下观察正在复制DNA,复制区域形如一只眼睛.核酸的生物合成专题知识讲座第10页
11(三)与DNA复制相关酶和蛋白质1、DNA聚合酶2、拓扑异构酶3、DNA解旋酶4、单链结合蛋白5、引发酶及引发体6、DNA连接酶当前已发觉30各种酶及蛋白质因子参加DNA复制核酸的生物合成专题知识讲座第11页
121、DNA聚合酶(1)反应需要有模板指导;(2)4种dNTP为底物,需要引物,需要有3?-OH存在;(3)合成方向为5??3?(4)需要Mg2+催化反应特点:核酸的生物合成专题知识讲座第12页
13核酸的生物合成专题知识讲座第13页
14在大肠杆菌中发觉主要有三种DNA聚合酶,分别为:DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶ⅡDNA聚合酶Ⅲ?E.coliDNA聚合酶DNA聚合酶IV和V:1999年发觉,当DNA严重损伤时,诱导产生。核酸的生物合成专题知识讲座第14页
15DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶ⅡDN
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