dna的遗传操作以细胞的遗传操作.pptx

dna的遗传操作以细胞的遗传操作dna的遗传操作以细胞的遗传操作第1页

DNA遗传操作限制性核酸内切酶DNA限制性酶分析DNA次序测定重组DNA基因文库构建dna的遗传操作以细胞的遗传操作第2页

限制性核酸内切酶限制与修饰作用限制性核酸内切酶E.coliKE.coliBE.O.P=1E.O.P=10-4E.O.P=1λ.Bλ.Kdna的遗传操作以细胞的遗传操作第3页

限制酶—能识别和切断外来DNA而使它失去复制能力修饰酶—能使限制酶识别序列中若干个碱基甲基化，限制酶不能识别它dna的遗传操作以细胞的遗传操作第4页

限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶可分I型,II型和III型三类识别序列有3个特点：由4~6个核苷酸组成，回文结构，可被有规律替换II型限制酶切割类型：错切和平切两类dna的遗传操作以细胞的遗传操作第5页

DNA限制性酶分析(自学）病毒基因组限制性酶分析遗传病限制性酶分析dna的遗传操作以细胞的遗传操作第6页

DNA次序测定—原理Sanger加减法原理：极其复杂核苷酸排列次序可由简单不一样长度核苷酸推算出来末端终止法原理dna的遗传操作以细胞的遗传操作第7页

重组DNA重组DNA(recombinantDNA)--从同种生物不一样部位或是从几个起源得到核苷酸次序共价连接而成DNA定义为重组DNAdna的遗传操作以细胞的遗传操作第8页

重组DNA目标基因分离和合成载体目标基因与载体连接重组DNA导入宿主细胞和选择dna的遗传操作以细胞的遗传操作第9页

目标基因分离和合成方法利用解链温度不一样分离目标基因利用分子杂交技术分离目标基因利用不一样转导噬菌体分离目标基因散弹射击法分离目标基因化学合成基因反向转录法合成基因dna的遗传操作以细胞的遗传操作第10页

载体应具备条件进行松弛型复制，产生大量拷贝有一个或各种限制酶单一识别位点带有一个或几个可供选择标识dna的遗传操作以细胞的遗传操作第11页

目标基因与载体连接--方法粘性末端连接平整末端连接同聚末端连接人工接头连接dna的遗传操作以细胞的遗传操作第12页

重组DNA导入宿主细胞方法转化，以质粒为载体转染，以去外壳噬菌体DNA为载体转导，用离体包装外壳噬菌体DNA为载体微注射，把重组DNA直接注入受体细胞dna的遗传操作以细胞的遗传操作第13页

重组DNA导入宿主细胞后选择遗传学方法--抗药性改变检测免疫学方法--检测外源性蛋白质(Westernblotting)分子杂交方法(Southernblotting)dna的遗传操作以细胞的遗传操作第14页

转化细菌筛选转化子生长在含Tet和Amp培养基中转化子生长在含Amp但不含Tet培养基中+DNA连接酶质粒载体外源DNAAmprTetrAmprTetsAmprAmprTetrTetsBamHIBamHIBamHIBamHIBamHIdna的遗传操作以细胞的遗传操作第15页

基因文库构建基因文库(genelibrary)--将某种生物细胞总DNA全部片段随机地与载体连接并转入到宿主细胞中，经过细胞增殖而构建成各片段无性繁殖系（clone克隆），这一组克隆总体叫做某种生物基因文库dna的遗传操作以细胞的遗传操作第16页

细胞遗传操作细胞融合淋巴细胞杂交瘤技术细胞拆合外源基因导入受体细胞dna的遗传操作以细胞的遗传操作第17页

细胞融合细胞融合方法--化学融合和电融合杂种细胞选择基因定位--同线测定，染色体定位和区域定位dna的遗传操作以细胞的遗传操作第18页

淋巴细胞杂交瘤技术克隆选择学说--一个细胞，一个抗体淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体--一个淋巴细胞免疫后只产生一个抗体dna的遗传操作以细胞的遗传操作第19页

细胞拆合核移植是指将一个细胞细胞核移植到另一个去掉细胞核细胞质内雌核发育是指精子虽能正常进入和激活卵细胞，但精核不参加卵细胞发育，由卵核加倍形成二倍体单性生殖方式dna的遗传操作以细胞的遗传操作第20页

外源基因导入受体细胞染色体介导基因转移DNA介导基因转移转基因动物dna的遗传操作以细胞的遗传操作第21页

第十章变异基因突变分子基础基因突变机制DNA损伤修复染色体结构变异染色体数目变异dna的遗传操作以细胞的遗传操作第22页

基因突变及其特征基因突变就是一个基因变为它等位基因基因突变特征：可逆性，多方向性，低频率性dna的遗传操作以细胞的遗传操作第23页

基因突变分子基础碱基置换突变移码突变片段突变dna的遗传操作以细胞的遗传操作第24页

碱基置换突变类型转换（transposition）：嘌呤嘌呤；嘧啶嘧啶颠换（transversion）：嘌呤